ヒト補体断片5 a ELISAキット

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酵素結合免疫吸着試験実験上の考慮事項
　　1.正式試験の時、それぞれ陽性対照と陰性対照で試験条件を制御し、検査待ちのサンプルは1式2部とし、実験結果の正確性を保証しなければならない。場合によっては本底が高く、非特異的反応があることを示し、羊血清、ウサギ血清またはウシ血清アルブミン等閉鎖。
　　2.に酵素結合免疫吸着試験において、各実験条件の選択を行うことが重要であり、その中には:
　　(1)その形態は、凹孔平板、試験管、ビーズ等であってもよい。現在よく使われているのは40孔ポリスチレン凹孔板。いずれの担体であっても、使用前にスクリーニングすることができる：等量抗原で被覆し、同じ実験条件下で反応を行い、その発色反応が均一性であるかどうかを観察し、それにより吸着性能が良好であるかどうかを判明する。
（2)ひふく抗体(または抗原)の選択：抗体を()固相担体表面に吸着する場合、純度が良好であることが要求される,吸着時の一般要求PHに9.0～9.6の双曲線コサインを返します。吸着温度、時間及びその蛋白量にも一定の影響がある,4℃18～24時間です。タンパク質被覆の適切な濃度は、異なるタンパク質濃度で滴定する必要がある：(0.1、1.0和10μグラム／ミリリットル等)被覆を行った後、他の試験条件と同時に陽性検体のCD値を入力します。選択CD値zuiは大きく蛋白量の少ない濃度。多くのタンパク質にとって通常は1～10μグラム／ミリリットル。
　　(3)酵素標識抗体の動作濃度の選択：まず直接酵素結合免疫吸着試験法による初歩的な価格の滴定(酵素標識抗体部分を参照)を選択してから、他の条件を固定したり、“かくれつほう”(被覆物、検査対象サンプルの参考品及び酵素標識抗体はそれぞれ異なる希釈度である)
　　(4)酵素の基質及び水素供与体の選択：水素供与体の選択要求は安価で、安全で、明らかに発色反応があり、それ自体は無色である。一部の水素供与体(如OPD等)潜在的な発癌作用があるので、防護に注意しなければならない。条件のある者は、発癌性がなく、感度の高い水素供与体、例えば腫瘍突然変異負荷和にアンモニウムえん現在比較的満足している水素供与体である。基質が一定期間作用した後、強酸または強アルカリを加えて反応を停止しなければならない。通常基質作用時間は、10-30分がいい。基質使用液は新鮮に調製しなければならない、特にかさんかすいそ直前に加える。