微生物の迅速検出バイアル:診断
1.微生物検査ボトルは生きた菌を検査する以外に、死菌を検査することができますか?
答え:いいえ、彼らは死んだ細菌を検出できません。
2.微生物検査ボトルは嫌気菌を検査することができますか?
答:これらのバイアルの検出範囲には、亜硫酸塩還元クロストリジウムやウェルシュ菌などの嫌気性細菌と好気性細菌が含まれる。
検出瓶に含まれる試薬は、標的微生物の特定のタイプによって異なる。ウェルシュ菌などの嫌気性細菌には、専門の試薬を使用します。
3.これらの小瓶の検出原理にはどのような具体的な検出方法が採用されているのか。
A:培養方法、酵素法、免疫学方法及び遺伝学方法に基づく。
4.質問3について、各方法の長所と短所を簡単に説明できますか。
答え:伝統的な培地方法、コロイド金検査、酵素免疫測定またはPCR方法と異なり、単独で使用する場合、ドイツの微生物検査システムは多種技術の全面的な統合を代表している。どの検出方法を単独で使用しても固有の欠点がある、例えば:
PCR方法には専門技術者と高価な設備が必要である、
文化メディアの方法は複雑な操作プログラムに関連し、
コロイド金の分析感度が低い、
酵素免疫アッセイは標的捕捉において十分な特異性を欠いている可能性がある。
ドイツシリーズの高速微生物検出ボトルは、上述の方法の共同応用を代表し、各技術の利点を有効に利用し、同時にそれぞれの限界を補う。
5.これらの小瓶を用いて微生物検査を行う場合、まずサンプルを添加すべきですか、それとも無菌水を添加すべきですか。
A:どの注文でも承諾できます。6.無菌環境でサンプルに微生物接種を行う必要がありますか。
A:検出瓶は特定の目標を捕捉し、分析方法を使用して動作する。したがって、無菌環境は厳密には要求されていない(実際には、ほとんどの臨床試験場所は非無菌環境である)。
7.検査ボトルは表面サンプルと固体サンプルを検査するために使用できますか?
A:はい、固体、液体、表面サンプルをテストすることができます(表面サンプルについては、提供された無菌水で濡れたスワブを使用して表面を拭く)。ペースト、半固体、またはパルプなどの粘性試料も試験することができる。
8.検査ボトルを用いて固体サンプルを試験する場合、研磨や希釈などの前処理が必要ですか。
答え:いいえ、サンプルを直接検査ボトルに入れるだけで、事前処理は必要ありません。
9.毎回のテストにはどのくらいの無菌水が必要ですか。
A:一般的には11 mlです。液体サンプルまたは水サンプルを検査する場合は、1 mlサンプルと10 ml無菌水を添加することをお勧めします。
10.試料と無菌水を添加した後、「完全に溶解し、混合することを確実にするために揺動する」工程は定性と定量分析の強制的な手順ではないか。
A:はい、揺れ混合は定性と定量分析の強制的なステップです。
11.異なる微生物は同じ培養温度を必要としますか?例を挙げて説明してください。
いいえ、彼らは持っていません。ほとんどの微生物は総生菌数、サルモネラ菌、リステリア菌など37°Cを必要とし、大腸菌などの他の微生物は44°Cを必要とする。
12.オードブルやアイスクリームなどのサンプルをテストする場合、低い温度で孵化させるべきですか。A:サンプル自体の温度に制限はありません。しかし、試料中の微生物を試験する際には、参考図表に示す目的微生物に対応する特定の培養温度を厳守しなければならない。
13.試験プロセスを速めたい場合、培養温度を目標微生物の指定温度より高く設定してもいいですか。
A:いいえ。参考図表を厳守しなければなりません。
14.マニュアルに規定されているサンプルの体積/重量はいくらですか。
答え:0.1グラム-1.0グラムまたは0.1ミリリットル-1.0ミリリットル。
15.実際のサンプルの体積/重量が規定の制限値を超えた場合、テスト結果は異なりますか?具体的には、結果(定量分析の場合)が人為的に高くなるのではないでしょうか。
A:試料の体積/重量が規定値よりやや高いか、またはやや低いかにかかわらず、定量分析の結果は影響を受けない。
原因:固体選択性培地上のコロニーカウントなどの既定の参考方法を含む伝統的な微生物検出方法は、50%を超える固有の「統計的離散度」を示す。(統計離散度、統計変異性とも呼ばれ、変数または確率分布の拡散を指す。一般的な例としては分散、標準差、4分桁間隔を含む。)多くの実験室はすでに実証して、他の試験方法と比べて、生物検査方法の統計離散度は低く、信頼性は高い。しかし、25〜30%の統計的離散性は依然としてプロセス固有である。また、*サンプリング*段階で導入される統計的分散性、特に肉類製品などの固形食品の場合、微生物がしばしば繁殖することも考慮しなければならない。
したがって、0.5 gのサンプルを添加して得られた結果は、統計的には1.5 gを添加して得られた結果と等しい(そして、他の試験方法を用いて得られた結果と同じ)。
16.低密度、緩い充填サンプル(小麦粉など)は標準手順を使用してテストできますか?
答え:はい、彼らはできます。 17.醤油などの濃い色のサンプルについて、色は定性試験結果の解釈を妨げるのではないでしょうか。何か提案はありますか。
A:測定機器を用いて定量分析を行った場合、この問題は発生しない。ただし、色の変化を視覚的に観察するだけで定性的に分析する場合は、次の手順に従います。
濃い色のサンプルでは、肉眼では色の変化がはっきり見えないかもしれないと心配している場合は、テスト前にサンプルを希釈することをお勧めします。質問15の答えを覚えていますか。0.5 gまたは1.5 gのサンプルを添加した結果は統計学的に同等である(そして他の方法で得た結果と同等である)。
同様の原理は希釈にも適用される。
18.水サンプルをテストする場合、無菌水を追加する必要がありますか?もしそうなら、いくらですか。
A:水サンプル1ミリリットルと無菌水10ミリリットルを加えることをお勧めします。
19.異なる微生物は同じ初期色と陽性結果色を示していますか。例を挙げて説明してください。
答え:いいえ、違います。
例えば、約10分間のインキュベート後、*サルモネラ菌*は通常赤色の初期色を呈し、黄色は陽性結果を示す。一方、リステリア菌*の初期色は青色であり、黄色は陽性結果を示す。詳細はグラフを参照してください。
20.微生物検査器具は培養箱としても使用されていますか。
はい、そうです。検査瓶を完全に揺動した後、すぐに検査器具に入れた。ソフトウェアで特定の微生物設定を設定すると、
機器はインキュベーションプロセスを自動的に実行し、定量分析レポートを生成する。
21.微生物検出装置も発振器/発振器の機能を持っていますか。
いいえ、ありません。手動でボトルを2~3分間激しく揺らすか、内容物が完全に溶けたり完全に混ざったりするまで機械振動子を使って約20秒間揺らす必要があります。
22.微生物検査機器の解釈結果の背後にある基本原則は何ですか。答え:微生物検出器は精密な光学リーダーである。光学原理を利用して、瓶の中の色の変化を正確に検出し、正確な定量分析報告を生成することができる。
23.微生物検査機器は外部電源を使用しているか、充電可能な電池を内蔵しているか。
A:外部電源から電力を供給します。
24.微生物検出器は同時にいくつの検出瓶を独立して分析することができますか?
8本です。同時に独立した検出を実行し、ボトルごとに個別の定量分析レポートを生成します。
25.微生物検出器を用いて定量分析を行うために、コンピュータに分析ソフトウェアをインストールする必要がありますか。
A:はい、付属の分析ソフトウェアをインストールする必要があります。
26.この解析ソフトウェアと互換性のあるコンピュータオペレーティングシステムはどれですか。
答え:XP、Vista、Windows 7。
27.検出器が初めて電源を入れた場合、電源を接続した後、次のステップに進むにはどのくらいの時間待たなければなりませんか。
A:初めて電源を入れた場合は、起動後約40秒待ってから作業を続けることをお勧めします。
28.定量分析を行う時、検査瓶は十分に混合した後、直ちに検査器に入れるべきか、それとも少し待ってから挿入すべきか。
答え:十分に混合した後、直ちに検出器に入れなければならない。
29.検出瓶を検出器に入れたら、解析ソフトウェアで「開始」をクリックすると、検出ポートの対応するLEDはソフトウェアインタフェースでどの色に点灯しますか。
A:特定の検出ボトルに対応するインタフェースで「スタート」をクリックすると、このポートのLEDが緑から赤に変わります。これは検出プロセスが開始され、現在進行中であることを示しています。
30.検出プロセスが完了すると、分析ソフトウェアインタフェース上のポートに対応するLEDは、テストが完了し、新しいサンプルを挿入できることを示す色に復元されます。
A:検査中、LEDは赤色のままです。検査が完了すると、LEDは緑色に変わります。この時点で、新しい検出瓶を検出器の対応するポートに挿入して、次のテストを開始することができます。検出プロセスの持続時間は、実際に存在する細菌の数(微生物含有量が高い場合)またはグラフに規定された対応する持続時間(微生物濃度が非常に低い場合、試験持続時間はグラフに記載された1 CFUの検出に必要な時間を超えるべき)に依存する。 31.微生物検査ボトルに必要な分析時間とボトル中の微生物含有量との間にはどのような関係がありますか。
A:これは反比例関係です。つまり、微生物含有量が高いほど、対応する検出時間が短くなる、逆に、微生物含有量が低いほど、対応する検出時間が長くなる。
サンプル中の微生物含有量が高すぎると、検出器が示した定量分析結果は数分から数秒以内に顕著な変動を示すだろう。
もし微生物含有量が非常に低い(RVLMは非常に正確で敏感な機器であるため)場合、経験のあるユーザーは数時間(さらに数分)以内のデータ変化を観察することによって、目標微生物含有量が規定の要件を満たしているかどうかを初歩的に決定することができる。
32.分析を行う前に、測定する特定の微生物含有量(具体的には、国家基準で定められた許容微生物限度)を決定するための明確な実験目標を確立すべきではないか。
答え:これは非常に望ましいことです。
例えば、国家基準(例えばGBシリーズ)及び国際基準(例えばECシリーズ)はいずれも、種々の家禽及び畜産物中の微生物の存在の最大許容レベルを明確(又は半明確)に規定している。
より具体的には、微生物検査を行う際に、第1ステップは分析の目的を明確にすることである。例えば、国際標準EC 2073:2005では、新鮮な肉類における*大腸菌*の最大許容レベルは10平方CFU/gであり、これは新鮮な肉類1 g当たりの*大腸菌**の含有量が10平方CFUを超えてはならないことを意味する。この場合、参考表を参照して、*大腸菌*に対応する列を見つけ、値log(10平方CFU)=2を見つけた。次に、私たちは*大腸菌*行の値(2)を最初の列にさかのぼって、そこで対応する数字が14であることを発見しました。したがって、目視検査による定性分析であれ、検出器を用いた定量分析であれ、サンプル中の大腸菌含量が10平方CFUを超えるかどうかについての厳密で正確な分析結果を14時間の最長時間で得ることができる。瓶を定量分析に使用する場合、経験豊富な実験室技術者は、瓶中の微生物含有量を定量分析データに観察された動的変化に基づいて短時間(例えば、約10〜15分)で予備評価することができる。
33.微生物含有量検査の具体的な目標は何であり、参考図は何の役割を果たすのか。
A:それは測定された特定の微生物に対応する標準的な基準パラメータを決定する基礎であり、特に培養温度、初期色、分析持続時間、陽性結果色である。使用方法の詳細については、前の質問で提供された回答を参照してください。
34.CFUとは?
答:CFUは「コロニー形成単位」を代表する
培養後に得られた微生物クラスター(コロニー)単位の英語略語である。
それは細菌(特に可視)と真菌の測定単位である。CFU(コロニー形成単位)とは、特定の体積の希釈微生物懸濁液を寒天平板上に広げたり流し込んだりして、単一微生物細胞を表面に分散させる方法を指す。孵化後、生きた細胞ごとに異なるコロニーに成長する。顕微鏡を用いて単一微生物細胞を計数する従来の方法と異なり、CFU方法は主に*可視*細菌の数、すなわち標準条件下でコロニーを形成する細菌を測定する。本質的には、1ミリリットル当たりの懸濁液中に存在する単一微生物細胞の数を表す。伝統的に、このカウントは簡単に「単一細胞」または「カウント」と呼ばれている。しかし、単一コロニーは必ずしも単一細菌によって生成されたものではないことが分かっている。細菌(細菌凝集体)のグループに起源する可能性があります。この場合、単に「単一細胞」と呼ぶのは完全に正確ではありません。正確な用語は「コロニー形成単位」で、略称は「CFU」です。「キログラム」と「キログラム」の2つの用語に似ています。これらは同じ数の異なる名称にすぎません。
CFUは「コロニー形成単位」を表す。CFU/mLは1ミリリットル当たりのサンプルに含まれるコロニーの総数を指す、固体培地に対応する単位CFU/gも用いた。
35.大腸菌群カウントが10 ^ 6 CFU/gまたは10 ^ 6 CFU/mlを超えるかどうかを判断するためにサンプルをテストする必要があると仮定します。
瓶内の色変化を目視で定性的に分析するには、「培養温度と比色参考図」を参照して検査手順を詳細に説明してください
答え:ステップ1:サンプルの追加
測定されるサンプル(0.1〜1.0 gまたは0.1〜1.0 ml)を添加し、次に無菌水11 mlを添加した。(試験材料の性質によります。液体であれば、サンプル1ミリリットルと無菌水10ミリリットルを添加することをお勧めします。違いは無視できます。)キャップをしっかり固定します。
ステップ2:中身が完全に溶けたり、十分に混ざったりするまで瓶を揺すってください。
手動で揺れる場合は、約2~3分強く揺らします。メカニカルバイブレータを使用すると、約20秒間揺れます。
手順3:試験結果を適切なタイミングで説明する。
(1)視覚定性分析:図表を参考にして、大腸菌群に対応する具体的な培養温度、初期色、検査時間、陽性結果色及びその他のパラメータを確定する。
孵化温度:参考図表によると、これは37°Cである。
初期色:ボトルが完全に揺られ、37°Cの培養箱に約10分間放置された後に現れる色を指す。参考グラフによると、この色は赤です。
検査時間:我々の検査基準は大腸菌群の含有量が10 ^ 6 CFU/gまたは10 ^ 6 CFU/mlを超えるかどうかを確定することを要求している。参考図表に基づいて、対数10 ^ 6=6に対応する列を見つけ、数値6に対応する行を見つけます。これは検出時間が6時間であることを示している。そのため、観察時間は6時間に設定されている。
陽性結果の色:参考図表によると、大腸菌の陽性結果を示す色は黄色である。必要な情報が確認されたら、十分に混合された試験瓶を37°Cの恒温培養箱に入れ、干渉しないように維持した。インキュベーションの約10分後に、大腸菌検出に対応する初期色である赤色を示す試験瓶が観察されます。孵化を続ける6時間標識で再び瓶を観察した。色が黄色になると、サンプル中の大腸菌含有量が10 ^ 6 CFU/gまたは10 ^ 6 CFU/mLを超え、サンプルは不合格と見なされた。色が黄色くならず、最初の赤色に保たれているか、中間色調に変化している場合、サンプル中の大腸菌含有量は10 ^ 6 CFU/gまたは10 ^ 6 CFU/mLを超えておらず、サンプルは要求に合致していると考えられる。
(2)検出器を用いて定量分析を行う場合:
この手順については、次の質問を参照してください。
ステップ4:滅菌
最後に、テストキャップの上部を押してボトルを消毒することを忘れないでください。キャップを押した後、ボトルを揺らす。今は安全に捨てることができます。
注意:実験中、試験キャップの上部に触れないようにして、不適切な時間に予期せず消毒しないようにしてください。これは試験結果に影響を与える可能性があります。
36.検出器と結合して問題34を実行して正確な定量分析を行う場合は、操作手順の詳細な説明を提供してください。
答え:検出器を使用して定量分析を行う場合:
すぐに十分に混合されたテスターボトルを検出器に入れます。検出器ソフトウェアを起動し、「ステーション」をクリックして関連情報(検査員名、試験タイプ、サンプルID、顧客/ソース、試験時間など)を入力します。ソフトウェアインタフェースの「解析タイプ」ドロップダウンメニューから、検出する特定の微生物タイプを選択します。「OK」をクリックし、「スタート」をクリックします。LEDが赤に変わり、デバイスが解析フェーズに入ったことを示します。検出器が示した定量的な解析データを監視して判断する。
37.なぜ試験が完了するまで検査瓶の蓋を押せないのか。
答:滅菌過程。キャップに消毒剤が入っている、蓋を押すとこの試薬が瓶に放出され、そこで内部溶媒と反応して消毒プロセスを完了する。したがって、実験中は、検出ボトルのキャップに触れないようにしてください。






