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Thermo Fisher Scientific consumables for chromatography
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Thermo Fisher Scientific consumables for chromatography

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技術革新による品質向上と効率化|1つの移動相条件による蛋白質、mRNA及びAAVのポリマー分析の完了
日付:2025-05-27読み:1

SurePac Bio 550 SEC MDI革新技術


1

Monodisperse(単分散粒子):

均一な3µm単分散シリカゲル粒子技術、優れた孔径分布、クロマトグラフィー分離における拡散効果の影響を低減した。


2

Inert technology(不活性技術):

先進的な充填材包装技術は、イオン交換部位を遮蔽し、非特異的結合、生物不活性ハードウェアを最小化し、非特異的結合を低減すると同時にMS、CAD、MALSなどの検出器と互換性がある。


3

High-Reproducitivity(高再生)

カラムフィラーの装填を精密に制御し、より高い品質制御放電基準を実現し、高いカラム効果を保証すると同時に、優れたバッチ間一致性を実現した。


4

High-Throughout(ハイフラックス)

4.6 mmX 150 mmのカラムはHPLCとUHPLCシステムに同時に互換性があり、7分間でサンプルの分析を完了することができる。


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技術革新-蛋白質分析の異なる移動相条件の結果比較

異なる塩濃度における蛋白分離対照図

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異なる割合の有機溶媒下のタンパク質比較スペクトル

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スライド表示詳細

先進的なフィラー包装技術は、イオン交換部位を遮蔽し、非特異的結合を最小化し、生物不活性なステンレス鋼SurePac Bio 550 SEC MDIカラムは、タンパク質とカラムの非特異的結合を低減し、図(1)に示すようにpH 6.8条件下で、塩濃度を変化させて500 kDaタンパク質分離に与える影響を低減した。高濃度の塩化ナトリウムはややポリマーとモノマーの分離度を高めることができ、緩衝液濃度は20-50 mmol/Lの間で、ポリマーと主ピークの分離度の差は大きくない。図(2)に示すように50 mmol/LNaH2PO4+300 mmol/L NaCl(pH 6.8)系において、0〜15%の異なる割合のアセトニトリルを添加することによるタンパク質サンプル分離への影響を比較し、本実験ではカラムとこのサンプルには疎水性吸着がほとんどなく、アセトニトリルを添加しない系においてはポリマーと主ピークの分離度及びポリマーのピークピーク谷比が最適であることを発見した。実験結果は、SurePac Bio 550 SEC Mdiカラムとこのタンパク質との間のイオン性吸着と疎水性吸着は非常に低く、アセトニトリルを添加しない系ではポリマーとタンパク質を分離することができることを示している。

50 mmol/LNaH2PO4+300 mmol/L NaCl(pH 6.8)条件下でmRNAを分析した結果

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50 mmol/LNaH2PO4+300 mmol/L NaCl(pH 6.8)条件下の蛍光検出器下でAAVを分析した結果

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50 mmol/LNaH2PO4+300 mmol/L NaCl(pH 6.8)条件下のUV検出器下でAAVを分析した結果

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図(2)(3)(4)(5)に示すように、SurePac Bio 550 SEC Mdiカラムは、500 kDaタンパク質、mRNAおよびAAV 9モノマーおよびポリマーの良好な分離を15分以内に達成した。サンプルとカラムの間のイオン性吸着と疎水性吸着はいずれも比較的に低く、同じクロマトグラフィー流動相系では、3種類のサンプルのポリマーとモノマー分析を同時に完了した。生体適合性Vanquish Flex液相系では、カラムが異なる滴下のAAV 9を分離し、紫外線検出器と蛍光検出器の下に残留が観察されなかった。


参考文献:

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/088460

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/73405-157846A?SID=srch -srp-73405-157846A

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/43903-157831?SID=srch -srp-43903-157831

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