一、wyattマルチアングルレーザ光散乱計テスト前準備

溶媒準備

水相系：超純水または調製塩溶液（約1 L）を用いて、0.02%NaN 8323抗菌剤を添加し、0.22μmろ過膜でろ過した。

有機相系：HPLC級溶媒を用い、同様に0.22μmろ過膜でろ過した（輸入試薬は実際の状況に応じて処理した）。

サンプル準備

分子量範囲に応じた濃度（定量リング100μL）を調製する：

分子量~ 1000 kDa：0.5-1 mg/mL

分子量~ 100 kDa：1-2 mg/mL

分子量~ 10 kDa：3-5 mg/mL

分子量~ 5 kDa：5-10 mg/mL

試料は0.22μmまたは0.45μm濾過膜で濾過するか、遠心処理により不純物を除去し、できるだけ流動相を用いて調製する必要がある。

計器検査

電源ケーブル接続、電源スイッチ、スイッチ（ケーブル信号接続用）がオンになっていることを確認します。

二、計器の起動と平衡

電源投入順序

ポンプ、カラム温度箱（設定温度）、注入システム（手動/自動注入器）、示差または紫外線検出器、粘度検出器、多角度レーザー光散乱検出器の電源とコンピュータを順番にオンにします。

システム洗浄と平衡

ポンプをONにし、システムを超純水で約5分間洗浄（ポンプ）し、ポンプをOFFにします。

最新に調製された移動相洗浄システム（有機系は直接移動相を使用）を使用する。

流速を0.1 mL/minに調整する（粘度検出器に接続する場合は、動作インタフェースに入ってからポンプをオンにし、IP&DPはpurge on状態にする）。

GPC/SECカラムがシステムに接続されていない場合は、流速を直接0.1～1.0 mL/minに調整することができます（粘度検出器がない場合は、示差検出器のpurgeバルブは「Purge On」状態である必要があります）。

もしシステムにGPC/SECカラムが接続されている場合、0.1 mL/minを開始流速とし、1-2分ごとに0.1 mL上昇し、流速を0.4-0.5 mL/minに調整し、システムを十分にバランスさせる必要がある。

平衡時間：水相システムは1日前に洗浄と平衡を提案し、2日目に試験を開始する、有機相系の平衡時間は一般的に3〜12時間である。

三、テスト操作とデータ収集

システムバランスとベースラインの安定化

システムが十分に平衡した後、流速を試験流速に徐々に調整する。

示差検出器のPurgeバルブを「Purge Off」状態に調整し、信号が安定したらゼロにする（Zero）。

粘度計（Visco Star）の操作方法は付属品を参照し、ベースラインが安定するまで待つ。

呼び出し試験テンプレート

Astraソフトウェアで適切な試験テンプレートを呼び出します（インストールエンジニアが作成したTemplate/Methodを使用することを推奨します）。

単針注入：File→New→Experiment from Template/Method→My Templates/methods、該当する試験テンプレートを選択します。

オートサンプラサンプリング：File→New→sample set Template/blank sequence→My Templates/method、該当試験テンプレートを選択する。

サンプリングとデータ収集

注入バルブを「load」から「inject」状態に移行し、注入システムを通じて注入します。

Astraソフトウェアは自動的にデータ収集を開始し、データ収集が完了すると、ソフトウェアは設定時間に応じて停止するか、手動で停止する（Experiment→Stop）。

データ保存

データ収集が完了したら、File→Save as…の順にクリックし、ファイルを命名して保存します。

四、wyattマルチアングルレーザ光散乱計データ処理とレポート表示

データ処理プロセス

ベースライン調整：Baselineをダブルクリックし、LS 11（90°角）をチェックし、ベースラインの端点を調整し、ベースラインのレベルを保証し、OK/Applyをクリックして保存する。

定峰：マウスを峰の開始点まで移動し、左ボタンを押しながら峰の落下点までドラッグし、左ボタンを放して峰領域を定義し、峰領域のエッジを微調整し、OK/Applyをクリックして保存する。

dn/dc値入力と正規化：dn/dc値を入力し、normaliseを選択します（テンプレートにBSA、dextranなどの<50 kDa標準サンプルが使用されている場合、このシステムで正規化する必要はありません）。

≪レポートの表示｜View Report｜emdw≫:上記の手順が完了したら、テスト結果を取得するレポートを表示します。

計器校正（定期的に行う）

遅延体積補正：各検出器間の管路体積を補正し、ピーク先端位置の整列を確保し、通常はインストールエンジニアが完成し、結果はAstraソフトウェアテンプレートに保存される。

90°角信号補正（トルエン補正）：90°角散乱光強度値と電圧値の補正係数を取得し、年または半年ごとに推奨する。

十八角度正規化補正：90°角を基準として、他の17個の検出器を較正し、Rg<10 nmの標準品（例えば、30 kDaのデキストランまたはウシ血清アルブミンBSA）を用いて補正を行った。