一、ハイフラックスダイナミック光散乱計操作前準備
環境要件
平穏、乾燥、温度の適切な場所を選んで機器を設置し、機器の底部と地面が平穏に接触し、光路が垂直に地面にあり、機器の底部が地面から少なくとも50 cm離れていることを確保する。
空気の流れ、振動及び強い電磁干渉源（例えば大型モータ、高周波設備）を避け、測定環境の安定を確保する。
サンプル調製
分散性：試料は液体媒体中に均一に分散し、凝集や沈殿を避ける必要がある。分散剤は透明で、溶質粒子の屈折率とは異なり、清潔で濾過可能である必要がある。
濃度制御：
タンパク質サンプル：14 kDaタンパク質濃度は1 mg/ml、28 kDaタンパク質濃度は0.5 mg/mlを推奨した。
その他のサンプル：粒径の大きさに基づいて濃度を調整し、多重光散乱（濃度が高すぎる）または信号が弱すぎる（濃度が低すぎる）ことを避ける。
気泡除去：試料は12000 rpmで10分間遠心分離し、清液を取り、気泡の影響測定を避ける。
試料量：試料プールの容量は約14μlで、充填を確保するために20μlの試料を準備することを提案した。
計器検査
電源、接続線、光路システムが正常かどうかを検査し、レーザ、検出器、温度制御モジュールなどの部品の接続がしっかりしていることを確認します。
予熱装置は10〜15分間、システムが安定したら測定を行う。
二、電源投入とソフトウェア接続
電源投入手順
電源を投入し、ホスト、温度制御モジュール、コンピュータの電源を順次オンにします。
測定ソフトウェア（Zetasizer、IRSoftなど）を実行し、「Connect」または「Hardware」をクリックしてソフトウェアと機器の接続を確立し、接続が成功したらアイコンが緑になることを確認します。
パラメータ設定
レーザー強度：サンプル濃度に応じて調整する（高濃度サンプルは信号過負荷を避けるために電力を下げる必要がある）。
温度：測定温度（例えば25℃）を設定し、120秒間恒温してサンプル温度を安定させる。
溶媒パラメータ：溶媒の屈折率（RI）と粘度（Viscosity）を入力し、パラメータは温度変化に伴いリアルタイムで更新する必要がある。
サンプルパラメータ：タンパク質サンプルのようなサンプルの屈折率（RI）と吸収率（Absorption）を入力し、「Material」タイプを選択し、対応するパラメータを入力します。
測定時間：サンプルの安定性設定（例えば連続測定3回、毎回120秒）による。
散乱角度：通常は90°（小粒子）または173°（大粒子）を選択します。
データフィルタリング：Baseline=1±0.003などの偏差範囲を設定し、異常データをフィルタリングします。
三、サンプルの配置と測定
サンプルプール洗浄
微量液取器とサンプルプールを水で洗い流し、汚染を避ける。
微量液取機を用いて試料をゆっくりと試料プールに注入し、針がプールの底や側壁に擦られないようにした。
サンプルプールをサンプル室に入れ、矢印が自分に向いていることを確認し、サンプル室の蓋をします。
データ収集
「Start」または「Measure」をクリックして測定を開始し、機器は散乱光強度の時間変化を自動的に記録する。
測定中に機器やサンプルプールに触れないようにし、光路のずれを防止します。
赤色データは設定範囲を超えた値であり、解析時には採用しない。
四、データ分析と記憶
りゅうけいぶんぷ
ソフトウェアは流体力学半径（Rh）及び多分散性指数（PDI）を自動的に計算し、粒径分布図（例えば対数正規分布、MSDマルチサイズ分布）を生成する。
依存関数
光強度変動と時間の関係を分析し、サンプルの均一性を評価した。
データのエクスポート
CSV、Excel、またはPDF形式として保存し、さらに処理やレポート生成を容易にします。
五、操作後のメンテナンス
サンプルプール洗浄
測定完了後、直ちに水でサンプルプールを洗浄し、乾燥後保管し、残留サンプルの汚染を避ける。
光学素子のクリーニング
レーザ窓、プローブなどの光学素子を定期的にクリーニングし、クリーン布や専用洗浄剤を使用します。
計器検査
機器内部に異物やほこりがないかどうかを検査し、光路系乾燥管の吸湿状態を維持する（吸湿には乾燥再生が必要）。
標準粒子（ポリスチレンラテックスなど）を定期的に使用して較正し、測定の正確性を確保する。
ストレージ環境
機器を使用しない場合は、乾燥、通風、腐食性ガスのない環境に保管し、電源を切り、ダストカバーをかぶせる。
危険化学品との接触を避け、安全事故を防止する。
六、ハイフラックスダイナミック光散乱計一般的な問題の処理
光散乱強度が高すぎる
現象：計器に自己保護のヒントが現れた。
原因：サンプル濃度が高すぎるか、粒径が大きい。
解決：サンプル濃度を下げるか、レーザー強度を調整する。
データの均一性が悪い
現象：相関関数の変動が大きい。
原因：サンプルが均一ではないか、大きな粒子が存在する。
解決：サンプルを再遠心分離し、分散が均一であることを確保する。
光路オフセット
現象：測定データ異常。
原因：操作中に機器やサンプルプールに触れる。
解決：光路を再調整して、光路、物体と検出器の間の垂直と平行関係を確保する。