微生物サンプリングの過程で、交差汚染は設備の残留、人員操作、環境微生物またはサンプル間の相互汚染に由来する可能性があり、全プロセスから厳格な汚染防止措置を実施する必要がある。以下に、シーン別の標準化された操作ガイドと技術的なポイントを示します。
一、サンプリング前の設備と消耗品滅菌
1.ハードウェア滅菌規範
再利用可能なデバイス：
金属サンプリングヘッド（衝突サンプラーなど）：121℃高圧蒸気滅菌20分（GB/T 38512-2020）、または70%エタノール+火炎焼灼（現場応急処理に適用）を使用する。
プラスチック部品（サンプリングポンプ管路など）：0.1%過酸素酢酸を30分間浸漬し、さらに無菌水で3回洗浄し、乾燥後紫外線照射（254 nm、≧30分）した。
使い捨て消耗品：
培養皿、サンプリング袋などは照射滅菌製品（コバルト-60照射、用量≧25 kGy）を選択し、開封前に包装の完全性（ISO 11607-1標準）を検査する必要がある。
2.滅菌効果の検証
毎回滅菌後に生物モニタリングを行う：好熱脂肪バチルスATCC 7953胞子条を入れ、滅菌後培養（56℃、48時間）、コロニー数は0（GB 8599-2021）であるべきである。
二、サンプリング現場の操作汚染防止システム
1.人員無菌操作基準
三級防護要求：
一般環境：使い捨て実験服＋医療用手袋（例えばニトリル手袋）を着用し、サンプリング前に75%エタノールで手袋表面を拭く。
高リスク環境（例えば臨床サンプル）：無菌隔離衣+ゴーグル+二重手袋を着用し、サンプリングごとに外層手袋を交換する必要がある。
動作仕様：
サンプリング時に腕はサンプリング口の上を越えないようにして、サンプリングヘッドを体から≧30 cm離れたままにして、呼吸方向とサンプリング口は90°の角度を呈している。
サンプリングエリア内で髪を整えたり、顔を触ったりしてはいけません。設備を調整するには、手袋を交換したり、手を消毒したりする必要があります。
2.空間パーティションと気流制御
サンプリング領域の分割：
50 cm×50 cmの無菌操作エリアを設置し、75%エタノール散布テーブルで消毒帯を形成し、サンプラーをエリア中央に置く。
ISOレベル5クリーンルームなどの高潔なクリーンシーンは、層流テーブル（風速0.36-0.54 m/s）またはバイオセーフティキャビネット（BSC-IIレベル）内で操作する必要があります。
気流干渉制御：
サンプリング前にドアや窓を閉め、エアコンシステムの運転を10分間停止し（気流が外因性微生物を運ぶのを避ける）、人の移動は1メートル外に制御する。
三、サンプル採取過程の隔離措置
1.ロット別サンプリング交差防止方案
ロット間隔消毒：
1サンプルのサンプリングが完了するごとに、75%エタノールでサンプリング器の外殻、サンプリング口及び操作テーブルを拭き、5分作用してから次のサンプルの採取を行う。
異なる種類のサンプル（環境サンプルや臨床サンプルなど）を採取する場合は、残留微生物の混同を避けるために、サンプリングヘッドと管路をすべて交換する必要があります。
2.特殊サンプルの隔離技術
高濃度サンプル処理：
汚水、糞便などの高負荷サンプルを処理する場合、負圧ろ過付きサンプラー（例えばMilliporeEZ-Pak）を使用し、サンプリング後すぐにフィルタコアを密封し、エアロゾルの拡散を防止する。
病原菌サンプリング：
生物安全型サンプリングヘッド（例えばHEPAろ過付き閉鎖式サンプラー）を用い、サンプリング後に漏れ防止金属タンク（内層に吸水紙を敷く＋0.5%次亜塩素酸ナトリウム溶液）を入れた。