の標準的な操作説明の概要を参照してください。具体的な手順は実際のキット説明書に準じてください。

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一、実験前準備

1. 試薬と材料

   • キット（標準品、検出抗体、酵素標準板、基質A/B、終止液、洗浄液、封板膜などを含む）。
   • サンプル（血清、血漿、組織均質スラリーなど）。
   • 37℃恒温タンク、遠心分離機、ピペット、プレート洗浄機（または手動プレート洗浄機）、酵素スケール（450 nm波長）。

2. サンプル処理

   • 血清/血漿：遠心分離（3000×g、10分）し、清を採取する。
   • 組織ホモジネート：ホモジネート後遠心分離（5000×g、10分）し、上澄みを取る。
   • サンプルは繰り返し凍結融解を避け、4℃短期保存または-80℃長期保存する必要がある。

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二、操作手順

1.標準品の調製

• 標準品の凍結乾燥粉を希釈液で再溶解し、説明書の勾配に従って希釈する。

2.サンプリング

• 穴ごとに100μLサンプルまたは標準品を入れ、空洞を設ける。
• 封板膜を被覆し、37℃で90分間インキュベートした。

3.洗濯

• 穴内の液体を捨て、穴ごとに350μLの洗浄液を加え、30秒間静置した後に捨て、3回繰り返した。残留液体を拍乾する。

4.抗体インキュベーションの測定

• 1ウェル当たり100μLのビオチン化抗体作動液を添加し、37℃で60分間インキュベートした。
• 3回洗浄する（シンクロフラッシュ3）。

5.発色反応

• 1ウェル当たり100μLの酵素結合物（HRP標識）を添加し、37℃で30分間光を避けてインキュベートした。
• 5回洗浄する（chedi洗浄液を除去する）。

6.停止反応と示度

• 1ウェル当たり50μL終止液を加え、45 nm波長で15分間酵素スケールを用いてOD値を測定した。

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三、結果計算

1. 標準曲線を描く
   • 標準品濃度を横座標、OD値を縦座標とし、標準曲線（一般的なLogistic 4パラメータモデル）に適合する。
2. サンプル濃度計算
   • サンプルOD値に基づいて標準曲線式を代入し、LPA濃度を計算した。

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四、注意事項

1. 交差汚染を厳格に回避し、サンプリング時に銃頭を交換する。
2. 洗浄工程はchediを必要とし、信号に影響を与えないようにする。
3. 標準品と試薬は室温に戻してから使用する必要があります。
4. 終止液は腐食性があり、操作には手袋を着用する必要がある。
5. OD値が標準曲線の範囲を超えている場合は、サンプル希釈率を調整する必要があります。

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