shRNA発現クローン

OmicsLink™ shRNA発現クローンの特性
すべてのshRNAターゲット配列の選択は正確なアルゴリズムによって計算される。遺伝子によっては、shRNAの茎の長さは19〜29塩基対の間にある。これらは、shRNAクローニング発現後の高い発現抑制効率とzuiの低い脱標的効果（off target effect）を保証する。
クローンshRNAに用いられるベクターには、スローウイルスベクターと哺乳動物細胞を宿主とするベクターがあり、各ベクターは異なるプロモーターと追跡マーカー遺伝子を持って選択できる。

担体構造上には、安定化細胞株のスクリーニングマーカー（プリンマイシン）と緑色蛍光追跡マーカー遺伝子（EGFP）があり、これらの特性により、担体は安定化抑制効果の研究にも使用することができ、瞬時抑制効果の研究にも使用することができる。
スローウイルスベクターシステムを用いて、通常の分裂細胞へのshRNAの導入、および分裂せずにトランスフェクションが困難な目的細胞株の導入が可能である。
担体の各部分配列は、プロモーター、shRNAをコードする正義とアンチセンス鎖、ヘアピン構造、終端子、その他の継ぎ手配列を含むシーケンシングされている。

OmicsLink™ の応用
遺伝子発現低下shRNAクローンの単一遺伝子に対する遺伝子発現抑制効果は、不規則な配列を含む陰性対照クローンと比較することによって研究することができる。
シグナルパス研究当社のヒト遺伝子ORFクローンは異なるシグナル伝達、代謝、疾病パスと相関性、遺伝子ファミリーなどによって分類された。同じ経路が知られているshRNAクローンを96ウェルまたは384ウェルプレートの形で並べ、ある信号経路における遺伝子のセットの機能を一度に研究することができる。現在、当社はヒトのすべてのキナーゼ遺伝子に対するshRNAクローンを提供することができ、異なるキナーゼの機能によって分類されている。
ORF発現クローンの確証当社はshRNA対応人間標的遺伝子のORFクローンをすでに持っており、各種発現ベクターの中に入れられ、異なるラベルと追跡マーカー遺伝子を持つことができる。

製品保証

の発現ブロックは、プロモーター、ジャスティス、アンチセンスターゲットシーケンス、ヘアピン構造、終端信号、その他の継手シーケンスを含む全長シーケンス化されている。psi-sH 1ベクターに構築されたヒトキナーゼ群shRNAクローンについて、著者らは各遺伝子に1 ~ 3個のクローンを提供し、すべてのクローンはAPクロマトグラフィーによって標的遺伝子の発現抑制レベルが70%以上に達することを実証した。スローウイルスや哺乳類ベクターに構築されたshRNAクローンについては、遺伝子ごとに4つのクローンを提供しています。著者らは少なくとも1つのクローンがmRNAレベルで標的遺伝子の発現抑制レベルを70%以上に達することを保証し、前提として先に述べた検出方法を用いて、そして厳格に説明書に提供された操作フローと注意事項に従って実験を行う。


*本製品は研究用、臨床診断用ではありません