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アドレス
保定市恵陽街369号保定中関村革新基地研究開発センター15階1508室
保定ミッキーバイオテクノロジー株式会社
保定市恵陽街369号保定中関村革新基地研究開発センター15階1508室
Ribo-seqテクノロジサービス
技術原理
タンパク質は生命活動の主要な担い手であり、翻訳制御は細胞内の重要な制御方式でもある。翻訳はリボソームがmRNAテンプレートを読み取ってタンパク質合成の過程を指導することであり、遺伝子発現の重要なステップである。翻訳の過程は厳格に制御され、多くの疾患は神経退行性疾患、貧血症、発達障害などの翻訳異常と関連している。リボソームの構造と機能の研究は比較的に透徹しているが、翻訳過程の制御メカニズムについてはさらに深く研究する必要がある。
リボソーム印影配列決定(Ribosome profiling,リボース配列)、体内の翻訳状態を詳細に検出することができる。リボース配列の技術的コアは、リボソームに結合したmRNAと翻訳されている約30個のヌクレオチドを識別することである。リボソーム結合したmRNA断片を配列決定し、リボソームの翻訳中の位置を正確に記録することができる。書き起こしグループとリボース配列データを組み合わせて分析することで、タンパク質の合成速度を算出することができる。
技術的特徴
リボース配列タンパク質合成の時間、場所、位置、どのタンパク質が合成されているか、およびタンパク質合成の制御メカニズムを明らかにすることができる。リボース配列転写群からタンパク質群学への橋渡しを構築し、動物、植物、微生物の研究に広く応用され、成長発育、形態構築、疾病発生、逆境ストレス応答の制御メカニズムを明らかにするために用いられている。
リボース配列転写本の翻訳活性の研究、翻訳開始部位の同定、ORF位置と蛋白質の翻訳制御メカニズムに応用する。
リボース配列技術はすでに動物、植物と微生物の研究に広く応用され、成長発育、形態構築、疾病発生、逆境ストレス応答の制御メカニズムを明らかにするために用いられている。とにかく、リボース配列ゲノムレベルからタンパク質の翻訳状況を検出し、翻訳中のmRNA配列情報を取得し、翻訳制御メカニズムを解析することができる。
藍景科信優勢
実験周期が速く、品質が高く、結果が安定して信頼できる。
豊富な種の経験。
Ribo-seqテクノロジサービス実験フロー

ひょうじゅんせいしんぶんせき
(1)生データフィルタリングとシーケンシング品質評価
(2)リボソームRNA、tRNA、sRNA等の比較除去
(3)Reads長さ分布統計と長さフィルタリング
(4)比較参照ゲノム
(5)シーケンス飽和度解析
(6)ゲノム上のRFの分布統計と分類
(7)三塩基リズム解析
(8)翻訳遺伝子の統計と発現量の分析
(10)群間差異翻訳遺伝子解析
(11)差異翻訳遺伝子のGOとKEGG機能濃縮分析
リボース配列RNA−seqとの連携解析
(1)翻訳効率計算
(2)Ribo−seqとRNA−seqの相関解析
(3)翻訳効率と転写レベルの関連分析

分析プロセス

実験事例



サンプル送付要求
(2)動物組織サンプル:推奨サンプル量≧300 mg。
(3)植物組織サンプル:推奨サンプル量≧500 mg。
サンプルのグループ化
少なくとも2組のサンプル、対照群と実験群を含み、サンプル数提案:3 Vs 3。
参考文献
ブラルGA,ウェスマンJS。リボソーム分析により、タンパク質合成の内容、時間、場所、方法が明らかになった。『分子細胞生物学』誌。 2015. 16(11):651-664.
チャージC、Coukos G、Bassani-Sternberg M.免疫ペプチドを用いて腫瘍抗原を同定した。 2022. 40(2):175-188.
FreminBJ、Nicolaou C、Bhatt AS。ヒト微生物群中の数百種類の微生物のリボソームを同期分析した。Nat Protoc。 2021. 16(10):4676-4691.
インゴリア.NT,Brar GA,Rouskin S,McGeachy AM,Weissman JS。リボソーム保護されたmRNA断片の深さ配列決定により、体内翻訳されたリボソーム解析戦略を監視する。Nat Protoc。 2012. 7(8):1534-1550.
インゴリア.NT、Ghaemmagami S、Newman JR、Weissman JS。ヌクレオチド分解能のインビボ全ゲノム翻訳分析にはリボソームスペクトルを用いた。科学。 2009. 324(5924):218-223.
ジュンタウォンP、Girke T、Bazin J、Bailey Serres J.擬南マスタードリボソーム足跡の全ゲノム解析により明らかになった翻訳動力学。米国立科学アカデミー誌2014。111(1):E203-212。
ソイヤーEB、Cortes T.リボソームスペクトルは分枝桿菌の翻訳に対する理解を強化した。前微生物学。 2022. 13:976550.
Xu G、Greene GH、Yoo H、Liu L、Marques J、Motley J、Dong X.グローバル翻訳再プログラムは植物免疫調節の基礎層である。自然。 2017. 545(7655):487-490.