株切り穎粒線虫プローブ法qPCRキット（内参を含まない）

株切り穎粒線虫プローブ法qPCRキット（内参を含まない）

Anguina agrostisプローブリアルタイムPCRキット（内部制御なし）

株切り穎粒線虫プローブ法qPCRキット（内参を含まない）
TaqManプローブ法に基づくリアルタイム蛍光定量PCR技術。せん断株穎粒線虫の特定の遺伝子配列に対して、特異的プライマーとTaqMan蛍光プローブを設計した。PCR反応系において、株切り穎粒線虫の核酸が存在すると、プライマーは当該核酸の対応する領域に特異的に結合し、Taq DNAポリメラーゼの作用下で遺伝子増幅を行う。同時に、蛍光プローブは増幅された標的DNA配列と特異的にハイブリダイズし、Taq酵素は延伸過程で蛍光プローブを切断し、蛍光基とクエンチ基を分離させ、蛍光信号を放出する。蛍光信号の変化をリアルタイムで監視することにより、サンプル中のせん断株穎粒線虫の検出を実現する。次の特徴があります。

1.開けてすぐに使用し、ユーザーはサンプルDNAテンプレートを提供するだけでよい。

2.プライマーとプローブは最適化され、分析感度が高く、100コピー/反応に達することができる。

3.偽陰性サンプルの区別を容易にするために、陽性対照を提供する。

5.定性的検出と定量的検出の両方に使用することができる。定量に使用する場合、線形範囲は5桁以上です。

6.本製品は20μL系のプローブ蛍光定量PCR反応を50回で十分である。

7.本製品は科学研究にしか使用できない。

規格及び成分：

低温輸送、-20℃保存、保存期間は12ヶ月。
試薬試料DNAを調製した。

株切り穎粒線虫プローブ法qPCRキット（内参を含まない）使用方法：
一、希釈標準曲線サンプル（10 E 1-10 E 6コピー/μLの6つの10倍希釈度を例に）。標準品濃度は非常に高いため、以下の希釈操作は必ず独立した領域で行い、サンプルや本キットの他の成分を汚染してはならない）。製品の安定性を高め、拡散伝染性病原を回避するために、本製品は生体サンプルを陽性対照として提供せず、無伝染性DNA断片のみを陽性対照として提供する。

1.6個の遠心管を標識し、それぞれ6、5、4、3、2、1である。

2.コア付きガンヘッドを用いて45μL蛍光PCR専用テンプレート希釈液をそれぞれ添加し、好ましくはコア付きガンヘッドを用い、以下同じ）。

氷の上に置いて使う。

4.銃頭を交換し、5番管に5μL 1×10 E 6コピー/μLの陽性対照（前段階希釈で得られた）を添加し、十分に1分間振動させ、1×10 E 5コピー/μLの標準曲線サンプルを得た。氷の上に置いて使う。

5.銃頭を交換し、4番管に5μL 1×10 E 5コピー/μLの陽性対照（前段階希釈で得られた）を加え、十分に1分間振動させ、1×10 E 4コピー/μLの標準曲線サンプルを得た。氷の上に置いて使う。

6.6つの希釈度の標準曲線サンプルが得られるまで、上記の操作を繰り返した。氷の上に置いて使う。

二、サンプルDNAの調製

7.N個のサンプルがある場合は、N＋2個の抽出を設定することが好ましく、複数の1つはPC（サンプル調製陽性対照）、1つはNC（サンプル調製陰性対照）である。

PC。またNCとして水を使用します。

8.選択的方法でサンプルのDNAを精製し、本キットは市場のほとんどのサンプルDNA抽出キットと互換性がある。当社の無抽出核酸放出剤を選択して購入することもできます。

三、Probe qPCR反応（20μL系、サンプル調製室で行う）

9.定量分析を行い、1回だけ繰り返した場合、N＋9個のPCR管を標識し、そのうちN＋2個

前段階で得られたN＋2サンプル、1つはPCR陰性対照用（水でテンプレート化）、6つは標準曲線用であった。定性分析を行い、1回だけ繰り返した場合、N+4個のPCR管を標識し、そのうちN+2個は前段階で得られたN+2個のサンプルのために用いられ、1個はPCR陰性対照のために用いられ（水でテンプレートを作る）、1個はPCR陽性対照のために用いられる（第6ステップ第4号管の陽性対照希釈液を直接テンプレートとする）。

10.標識管に各成分を下表に加える（この表は1回の繰り返しのみを示している。サンプル管と陰性対照の設置が終わってから陽性対照を設置し、陽性対照サンプルはすべての管に蓋をして保存してから最後に加える）：

11.蓋をしてから機械に乗り、次のパラメータでPCRを行う：

四、データ処理

測定するサンプルのCt値を用いて標準曲線からサンプルDNA濃度のlog値を推定し、その濃度を推定した。

13.本キットを定性検査に使用し、陽性または陰性のみを判断する場合、陰性対照Ctは数値がないか、Ct値が40以上でなければならない。陽性対照は蛍光対数成長が必要であり、典型的な増幅曲線があり、Ct値は40未満でなければならない。測定サンプルに対して、そのCtが40未満であれば陽性である。Ct値がない場合、または40以上であれば陰性です。
科学研究だけでは臨床診断には使えない！すべての製品は科学研究のためだけに使用され、人や動物の治療など他の用途に使用されてはならず、誰にも製品やサービスを提供していません。実際の出荷先の製品説明書を基準にして、ウェブサイトの説明書は参考にしてください。