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上海浦東川沙鎮川沙路6619号上海起発実験試薬有限公司
当社 KlenTak-S配列決定酵素は、組換え発現であり、多段精製により調製された組換えタンパク質である。
活性定義活性単位とは 72℃下に、 1×AM PCR緩衝液1,30 min内将 10 nmole dNTP酸不溶性物質を組み込むのに必要な酵素量。特徴
1.特に適している ジデオキシヌクレオシド三リン酸 等修飾ヌクレオチドの組み込み反応
2.全長比 タッカー デオキシリボ核酸 ポリメラーゼ、本酵素は活性より低下
適用範囲
ジデオキシヌクレオシド三リン酸 ていしほうデオキシリボ核酸 シーケンシング(世代シーケンシング)
ピロりん酸分解伸長法 モノヌクレオチド多型 分析
ひんしつせいぎょ
厳格な品質管理検査を経て、この製品が最高の活性と純度を持つことを確保した。
酵素保存緩衝液
20 mM Tris-HCl(pH 8.0)、100 mMKCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、0.5%Nonidet P 40、0.5%Tween 20、および50%グリセリン。
適用例
以下の反応例として、 50μl標準 PCR参考までにシステム。実際 PCR条件はテンプレート、プライマー、目的の断片の大きさに基づいて最適化し、最適な反応条件を決定しなければならない。
1)以下の表に従って反応系を調製する
コンポーネント |
体積/μl |
しゅうのうど |
10×AM PCR緩衝液1 |
5 |
1× |
デオキシヌクレオシド三リン酸(2.0ミリモル) |
5 |
0.2ミリモル |
プライマー F(10ミクロン) |
1.5 |
0.3ミクロン |
プライマーR(10ミクロン) |
1.5 |
0.3ミクロン |
テンプレート |
可変* |
/ |
KlenTak-S配列決定酵素(5U/μl) |
0.5 |
2.5U |
にじじょうりゅうすい |
可変 |
/ |
そうたいせき |
50 |
/ |
*テンプレートDNA使用量パラメータ(50μl反応系):
ヒトゲノムDNA100-1000 ng ;微生物ゲノムDNA 10−100 ng、PCR製品は特徴的にカンヤンを引き起こした、1 ng-10%; プラスミドDNA 5−30 ng、MRT反応のcDNA 1 ~ 5μl
2)以下の条件で反応する、
95℃ |
2~5分 |
|
95℃ |
15秒 |
25~35サイクル |
55~72℃ |
20秒 |
|
72℃ |
1kb/min |
|
72℃ |
5分 |
3)アガロースゲル電気泳動検出ポリメラーゼ連鎖反応 生成物、または実験目的に応じて後続操作を行う。
注意事項1.PCR 条件と野生型 タッカー デオキシリボ核酸 ポリメラーゼは類似しており、特定の デオキシリボ核酸 のシーケンシング反応を最適化する必要があるかもしれない。2.本酵素の増幅能力は野生型より高い T空気品質 D該当なし ポリメラーゼが低下し、PCR 生産量は減少しており、一般的な用途にはお勧めしません PCR。3.使用不可 プローブ プローブ法 定量PCR。