臭化水素アガロースゲル

製品の性能と安心な操作を確保するために、使用前にこのマニュアルをよく読んでください。何か質問があれば、当社のアフターサービステクニカルサポートまたは現地の販売員にお問い合わせください（付録を参照）。

1.製品紹介

CNBr Focurose 4 FFは臭化シアンの活性化後にシアネート基を含む高速流速精製媒体であり、カップリングタンパク質、ポリペプチド、核酸などアミノ基を含む生体分子に適している。バイオ医薬精製プロセスにおいて繰り返し検証され、広く応用されている。

特徴は以下の通り：

a.応用が広く、臭化水素アガロースゲルアミノ基含有生体高分子のカップリングに適している。

b.多点結合、簡単、柔軟、迅速、有効で、生物分子の生物学的活性と安定性を効率的に維持することができる。

c.流速が速く、収率が高く、増幅しやすい。

表1：メディアパフォーマンスパラメータ

2.カップリング条件

a.（A液）洗浄

適量の沈降ゲル（0.83 g洗浄完了後、約1.0 ml）を採取し、5倍体積のA液で媒体を再懸濁し、5分後に溶液を抽出乾燥した。この手順を5回繰り返します。

備考：この工程は媒体を活性化するために使用し、A液の洗浄体積を十分に確保し、洗浄時間を0.5 h前後に固定する（時間がかかりすぎると媒体上の基が加水分解する）。

b.配位子溶液の調製

カップリングする生体分子をB液で溶解またはB液に置換する（生体分子濃度は1〜10 mg／ml、推奨は5 mg／ml）。

備考：カップリング時のpHと塩濃度がB液と一致することを確保する。

c.カップリング

洗浄後の媒体と準備した試料を等比（体積比）で混合し、室温条件下で3〜4 h穏やかに混合した。カップリング成功（カップリング前後の生体分子含有量の測定によるカップリング効率の決定）を確定した後、溶液を乾燥させた。

備考：カップリングは室温条件下で3-4 hカップリングすることを提案する。不安定な配位子に対して、4-8℃で一晩カップリングすることを提案する。

d.（C液）洗浄

結合後の媒体を5倍体積のC液で再懸濁し、溶液を抽気乾燥した。この手順を3回繰り返します。

備考：この工程は媒体中に残っている生体分子を洗浄するために使用され、洗浄は*。

e.閉鎖

5倍体積のC液を用いて再懸濁を行い、室温条件下で3〜4時間穏やかに混合した後、溶液を抽出乾燥した。

備考：この工程は媒体の上の基を閉鎖するために用いられ、室温条件下で3〜4時間穏やかに混合すればよい。

f.（D液とE液）洗浄

5倍体積のD液を用いて閉鎖後の媒体を再懸濁し、5分後に溶液を抽出乾燥し、さらに5倍体積のE液を用いて媒体を再懸濁し、5分後に溶液を抽出乾燥した。この手順を3回繰り返します。

備考：この工程は酸塩基洗浄に用いられ、カップリングが十分に緊密でない生体分子を除去する。

g.保存

5倍体積の精製水で媒体を再懸濁した後、乾燥させ、さらに5倍体積の20%エタノールで媒体を再懸濁した後、乾燥させ、最後に20%エタノールで浸漬保存した。

メモ：この手順は、微生物の成長を回避するために媒体を保存するために使用されます。

h.溶液調製

A液：0.001 MHCl、0.5 M NaCl、pH 3.0を調整し、4-8℃で保存する（A液を使用する前に予冷処理を行う）。

B液：0.2 M NaHCO 3、0.5 M NaCl、pH 8.3を調節する（結合する生体分子がIgGの場合、pH=8.5-9.0），室温保存。

C液：0.1 M Tris-HCl、pH 8.3を調節し、室温で保存する。

D液：0.05 M Tris-HCl、0.5 M NaCl、pH 8.5を調節し、室温で保存する。

E液：O.05 Mガニン、0.5 MNaCl、pH 3.5を調節し、室温で保存する。

F液：1.0 M NaCl、室温保存。

3.洗浄

洗浄後、強い結合性物質（例えば、強い結合性蛋白、変性蛋白、脂質など）を除去し、回復媒体の優れた性能（例えば、担持量、流動性、カラム効果など）を達成することができる。

5回使用するごとに洗浄することをお勧めします。具体的な洗浄頻度は精製された初期サンプルの清浄度に基づいて調整する必要があります。

⑴通常の洗浄

a.5〜10倍柱体積の精製水で洗浄する。

b.5〜10倍柱体積のD液で洗浄する。

c.5〜10倍柱体積のE液で洗浄する。

d.5〜10倍柱体積のF液で洗浄する。

e.5〜10倍柱体積の精製水で洗浄する。

f.5〜10倍柱体積の20%エタノールで洗浄して保存する。

⑵激しい洗浄

a.2−5倍柱体積0.2%非イオン性洗浄剤で洗浄した後、直ちに5−10倍柱体積精製水で洗浄した。

b.2−5倍柱体積6 M塩酸グアニジンで洗浄した後、直ちに5−10倍柱体積精製水で洗浄した。

c.5〜10倍柱体積の20%エタノールで洗浄して保存する。

備考：激しい洗浄条件が適用されるかどうかは主にカップリングされた生体分子の安定性に依存し、この条件を用いて洗浄する前に、まず小規模な予備実験をして生体分子の安定性を検証することを提案する。

4.応用事例

ケース1

ケース2

5.よくある質問

表2：一般的な問題と解決策

6.注文情報

表3：発注情報テーブル

備考：大規格包装製品またはその他の製品の購入については、当社の現地販売または販売前テクニカルサポートにお問い合わせください。