Calypso生体高分子相互作用分析器

Calypso生体高分子相互作用分析器成分−勾配多角度光散乱（CG−MALLS）を基礎とする生物高分子間相互作用分析システムであり、高速、自動、無傷、定量的に高分子間相互作用を特徴づけることができ、再現性が高く、感度が高く、サンプル修飾が必要ないなど多くの利点がある。このシステムは分子間の特異性および非特異性相互作用、凝集または解離の動力学などを分析することができる。分子間の特異的相互作用に対して、Calypsoはその自己重合作用及び異なる試料分子間の異重合作用を測定し、平衡解離定数Kd及び反応の化学量論数を得ることができる。非特異的相互作用については、その次元力係数を測定し、分子間の作用力及び強度を判断することができる。また、Calypsoは反応の動力学、試料の重量平均分子量及び二乗平均半径などの重要な分子情報を測定することもできる。

Calypso分析システムはサンプルを修飾（蛍光標識、固定化など）する必要がなく、溶液環境中で測定するため、サンプルの天然状態を大幅に保証することができ、それによって他の技術では得られない結果を得て、実際の生体高分子間の相互作用を特徴づけ、サンプルの回収が便利である。

Calypso分析システムの動作原理：成分−勾配多角光散乱（CG−MALS）は新しい分析技術の一つであり、分子量の変化を利用して分子間の相互作用を測定する。溶液中の高分子の散乱光強度は物質の濃度Cと重量平均分子量Mwに依存し、分子間で複合が発生し、Mwは増加する。例えば、すべてのタンパク質分子が二量体として現れると、散乱光強度も倍増する。可逆的な凝集に対して、タンパク質とモノマータンパク質の複合体の割合は、各タンパク質の初期濃度と緩衝液の条件に依存する平衡値に達する。組成や濃度によってMwが異なります。一連の異なる組成と濃度の光散乱結果を分析することにより、発生した凝集形態、それぞれの結合親和性Ka、結合と解離の平衡定数を決定することができる。手動調製割合及び測定は煩雑で、時間がかかり、操作誤差が生じやすい仕事であり、Calypsoシステムは自動化の過程を通じてCG-MALS手動操作の困難を克服し、サンプル調製、輸送及びデータの収集と分析を一体に集め、実験の繰り返し性を完璧に保証し、そして手動でサンプルを調製する時に操作誤差を導入する問題を解決した。

技術優位
1.インテリジェント化配合、手動配合時の誤差問題を解消した、
2.サンプルを直接試験し、標識化或いは固定化する必要がなく、サンプルの天然状態を大幅に保証した、
3.迅速な測定時間、30分で実験結果を測定することができる、
4.各種生物反応系の測定に適用する、
5.系中の自己重合及び異なる試料分子の異重合の分析、
6.化学量論点、平衡定数の分析、平衡定数範囲：pM–mM、
7.反応動力学の分析、
8.レーザー検出器、濃度検出器と併用し、物質のMw、Rg、A 2、A 3を迅速に測定する。Zimm図を取得する、

Calypso生体高分子相互作用分析器応用分野：
1.酵素反応系：酵素と阻害剤の相互作用、酵素動力学など
2.薬物探索：蛋白質間相互作用に対する薬物の影響など
3.免疫研究：抗原/抗体の相互作用など
4.方法の改善：第二次元力係数を測定及び調整し、抗体の精製を助け、多量体の組成を確定し、サンプルの優れた溶解条件を確定するなど。
5.結合特異性：化学量論点、平衡定数、イオン強度、pHまたは添加剤の多量体または蛋白結合への影響など。
6.多分子複合体の構造分析：一連の緩衝溶液、時間、温度変化の下で、高分子凝集過程における分子間の結合強度を特徴づけ、及びその化学量論関係を確定し、Mw及びRgを通じてその空間構造を判断する。