C 8166-CD 4+LUCヒトTリンパ球白血病細胞+LUC

C 8166-CD 4+LUCヒトTリンパ球白血病細胞+LUC

さいぼうとくせい

しゅぞく:ヒト源（知恵者）

組織ソース:血液（血）

病気:不明（未知（みちゅう））

年齢:不明（未知（みちゅう））

性別:不明（未知（みちゅう））

細胞型:リンパ母細胞（リンパ母細胞）

せいちょうとくせい:懸濁成長（ぶらさげる）

含有量：>1x10^6さいぼうすう

仕様：T25ボトルまたは1mL凍結貯蔵管包装

用途：科学研究用のみ。

輸送と保存

ドライアイス輸送及び蘇生生存細胞

（1）1mL凍結貯蔵管包装ドライアイス輸送、受領後-80冷蔵庫で一晩保存した後、液体窒素に転入したり、直接回復したりします。ドライアイスがきれいに揮発し、凍結保存管のキャップが脱落し、破損し、細胞が汚染されていることを発見したら、すぐに連絡してください。

（2）T25瓶が蘇生した生存細胞は常温で出荷し、受け取った後は細胞受信後の処理方法に従って操作する。

細胞受容後の処理

1)細胞を受け取った後、75%アルコール消毒ボトル壁将T25ボトルの配置37℃培養箱の放置約2-3h培養瓶の破損、液の溢れ、細胞の汚染が発見された場合は、写真を撮ってすぐに連絡してください。

2)で4または5倍顕微鏡下で細胞の状態を確認し、同時に受け取ったばかりの細胞に写真を撮る（10×，20×）各2-3アフターサービス時に受け取った細胞の状態の根拠として、培養瓶の外観写真1枚を保存した。

3）壁貼り細胞：細胞は37℃培養箱への放置2-3h、顕微鏡下で細胞の成長と壁貼りの状況を観察し、一部の壁貼り細胞は宅配輸送中に振動で脱落し、脱落して塊になることがある。もし鏡の下で細胞の成長密度を観察するならば60%以下、培養瓶から灌液培地を除去することができる（壁に張り付いていない細胞が遠心回収を必要とする場合は、元培養瓶に再懸濁して打ち込む）,新規に調製した専用培地を加える6-8mL、細胞培養箱に入れて培養を続けた。細胞増殖密度が70%-80%以上、細胞を継代処理することができる。継代過程で輸送振動により脱落した細胞は遠心回収が必要である。

4）備考：輸送用の培地（灌液培地）は細胞の培養には使用できません。説明書の細胞培養条件に従って新たに調製したものと交換してください細胞を培養するための専用培地。 細胞を受け取った後の最初の継代提案T25培養瓶1：2継代。

一.培地及び培養凍結保存条件の準備：

1）1640培地+10%FBS良質の子牛血清+1%P/Sデュアルリアクタンス+1%ピルビン酸ナトリウム+1%L-

2） 培養条件：気相：空気、95%;二酸化炭素、5%。温度：37摂氏度、培養箱の湿度は70%-80%。

3） 凍結保存液：90%血清、10%ジメチルスルホキシドあ、現金で割り当てます。

二. 細胞処理：

1） 凍結保存細胞の回復：

を含む1mL細胞懸濁液の凍結貯蔵管は37℃水浴中で急速に揺れて解凍し、含浸に加える4-6mL専用培地の遠心管に均一に混合した。に1000回転/分条件付き遠心分離3-5min、上澄み液を捨てる、専用培地再懸濁細胞。そして細胞懸濁液を添加して6-8ml専用培地のフラスコ（または皿）中37℃で一晩培養した。翌日の顕微鏡下で細胞成長状況と細胞密度を観察した。

2） 細胞継代：もし細胞密度が80%-90%、継代培養を行うことができます。

壁貼り細胞の継代については、以下の方法を参照することができる：

1. 培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まない公共放送サービス潤洗細胞1-2回。

2. 加入0.25％（w/v）トリプシン-0.53 mM EDTA培養瓶（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL)を選択し、37℃培養箱での消化1-2分（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、それから顕微鏡下で細胞の消化状況を観察し、もし細胞の大部分が丸くなって脱落したら、迅速に操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいてから添加する3-4ml含む10%FBSの培地を用いて消化を停止した。

3. 軽く泡立てて吸い出し、1000回転/分条件付き遠心分離3-5min、上澄み液を捨て、補充する1-2mL培養液の後に均等に吹き付ける。細胞懸濁液を1：2のスケールを新規に分割T25ボトル、追加6-8ml仕様書に従って構成された新しい細胞の成長活力を維持するための専用培地であり、その後の継代は実際の状況に応じて1:2~1:5の割合で行います。

3:細胞を受け取ったら培養前に3代の間に細胞種子を凍結保存して、後続の実験に備える。

C 8166-CD 4+LUCヒトTリンパ球白血病細胞+LUC