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アドレス
上海市松江区新町街1111号岩クリプトン広場1 A棟211室
製品分類
上海雅吉生物科学技術有限公司
概要
BxPC3；ヒト原位膵臓癌細胞（STR）：上海雅吉生物主要製品：細胞、細胞系、初代細胞、ATCC細胞代理購入、Elisaキット、生化学キット、PCRキット、免疫グループ化キット、抗体、組換えタンパク質、標準品などの通常試薬。新旧のお客様からのご相談を歓迎します。
製品詳細
一、 BxPC3；ヒト原膵臓癌細胞（STR）培養条件
培養条件 |
空気、95%；一酸化炭素2，5.37℃ |
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せいちょうとくせい |
はりつけせいちょう |
とうけつじょうけん |
無血清凍結保存液 |
継代メソッド |
1:2~1:3 |
代々の事情 |
2日間の液交換 |
備考 |
伝5−8世代プリンマイシン（1−4 ug／ml）スクリーニングを用いて固める 当ライブラリの細胞は科学研究のためだけに使用され、許可なく他の目的に使用されてはならず、使用者は当ライブラリの細胞を第三者に譲渡してはならない。 |
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二、BxPC3；ヒト原膵臓癌細胞（STR）受入後処理
蘇生細胞処理方法：良好な状態に培養した後、培養液を充填し、瓶の口を密封することは細胞を輸送する最善の方法である。受容細胞用75%アルコール散布全体細胞瓶，きびしい無菌後細胞瓶を培養箱に入れて静置する細胞状態を安定化するために2〜4時間。静置後顕微鏡で細胞の成長状況を観察し、細胞を異なる倍数で写真保存した（一番40 x、100 x、200 x各1枚），3日前の写真はい重要なアフターサービス根拠は、写真のデフォルト受信状態が良好であることを提供しない。
凍結保存細胞の処理方法：細胞を受け取った後、発泡箱の中にドライアイスが残っているかどうか、凍結保存管が完全で破損していないかどうかを観察し、もしドライアイスが気化したり、凍結保存管が解凍破損したりしていることが発見されたら、直ちに写真を撮って私たちに連絡してください。細胞の署名から3日以内に連絡がない場合は、デフォルトでは正常に出荷されています。回復の第1管に活性な問題があれば、すぐに連絡してください。技術者はあなたと相談して指導してから第2管を回復してください。当方に連絡せずに勝手に回復した第二管に問題が発生してもアフターサービスをしない。
細胞培養工程
一細胞継代：もし超過していない80%合流度の時、瓶詰めの培養液を遠心管に集め、5 mlの培地を残し、37℃、5%COを入れる2インキュベーションタンク細胞密度が超（ちょう）80%で継代培養が可能。
壁細胞手順は次のとおりです。
1）培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗する、
2）1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53 mM EDTA）を培養瓶に加え、培養箱に入れて1 min消化し、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり脱落した場合、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、6 mlの10%血清含有の培地消化を止める
3）細胞を軽く吹き付け、脱落後遠心管に吸引し、1000 rpmで5-8 min遠心分離し、上澄み液を捨て、1-2 mL培地を補充した後、均等に吹き付ける。
4）細胞懸濁液を5−6 mL毎に培地を補充し、新たに5−6 mLの培地を含む6 cm皿またはT 25培養瓶に1：2の割合で分けた。
（すなわち1つのT 25瓶を2つのT 25瓶または2つの6 cmの皿に継代接種する）
懸濁細胞次のように継承されます。
1、半液交換法
半交換液処理、培養瓶を立てて培養箱に静置1時間程度、3 ml程度の培地を軽く吸引し、その後3 mlの培地を補給し、培地の変色が遅い場合は、直接500 ul程度のFBSを加えることができ、継代の場合は直接5 mlの培地を補給して2つの培養瓶に分けて培養することができ、一般的には継代3回程度で遠心継代を1回行い、死細胞を取り除くことができる。
2、遠心交換法
フラスコが必要なら細胞懸濁液を遠心管に集めることができる1000rpm，5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mL培養液を補充した後、再懸濁混合した後、細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25瓶に分け、6-8 mlを明細書の要求に従って配置した新しい培地を添加して細胞の成長活力を維持し、その後の継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:5の割合で行った。
b細胞凍結保存：
1、細胞が培養瓶の80%面積を覆うまで成長した場合、T 25培養瓶の培養液を捨て、PBSで細胞を1回洗浄する。
2、0.25%消化液約1 mlを培養瓶に添加し、逆さま顕微鏡下で観察し、細胞が収縮して丸くなったら5 ml培養液を加えて消化を中止し、細胞を軽く吹き付けて脱落させ、その後懸濁液を15 ml遠心管に移し、1000 rpm遠心5 min ;
3、上清を捨て、沈殿細胞に1 mlのヤジ生物無血清凍結保存液（商品番号：C7001），よく混ぜたら凍結保存管に加える。
4、凍結保存細胞を直接入れる-80℃冷蔵庫でよく、後期など要（よう）細胞を液体窒素タンクに移し、則必要-80℃冷蔵庫中保管24時間以上また液体窒素タンクに転入する。
C細胞回復：
1、液体窒素から細胞凍結貯留管を取り出す（注意着用防護マスク)、すばやく配置 37℃の水浴中で解凍し、凍結保存管中に結晶がなくなるまで解凍し、次いで75%のアルコールで凍結保存管外壁を拭き、
2、凍結保存管中の細胞を含有量に移動する 5 ml培地の15 ml遠心管中、1000 rpm遠心5 min ;
3、廃棄物、沈殿物用5 ml培地の再懸濁、接種までT 25培養瓶、放すに37℃、5%コバルト2細胞培養箱で培養する、
4、翌日、新鮮な培地に変えて培養を続けた。
注意事項：一部の細胞は壁に張り付いていないので、輸送中に細胞が脱落しやすいのが正常な現象です。離脱が多いと培養瓶のすべての培養液を遠心管に集めることができ、1000 rpm遠心5 min、上澄みを集める過渡培養をする.（後期比較培養）、沈殿添加1-2ml，軽く吹きつけ、再懸濁し、1〜2分間消化した後、培地5 mlを加えて反応を停止した。さらに遠心分離し、清を捨て、培地1〜2 mlを加えて再懸濁した。次にフラスコ継代（2つのT 25）を1：2の割合で行い、新しい培地を5-8 ml/瓶に補充し、最後に37℃、5%COを入れた2細胞培養箱で培養する。
