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白色光共焦点顕微鏡の動作原理
日付:2025-12-15読み:0
  白色光共焦点顕微鏡共焦点イメージング技術と白色光照明を結合した高精度顕微鏡装置であり、サンプルの高解像度、高コントラスト三次元イメージングを実現することができ、その核心動作原理は共焦点光路設計と白色光光源の多帯域イメージングをめぐって展開し、具体的には以下の通りである:
一、コア構造基礎
  白色光共焦点顕微鏡のコアコンポーネントには、白色光源モジュール(通常はハロゲンランプ、LED複合光源)、ピンホール絞り群、走査振動子、対物レンズ、分光システム及び画像検出器が含まれ、ピンホール絞りは共焦点イメージングを実現するための重要な部品である。
二、光路伝送とイメージングフロー
光源はコリメート白色光源と連続スペクトルの混合光を放出し、コリメートレンズ処理を経て平行光束を形成し、さらに分光鏡(ハーフミラー)を通じて光路方向を変え、対物レンズに導く。
試料照射と信号励起の平行光束は対物レンズを介して集束された後、微小な光スポットを形成して試料表面に投射される。試料の異なる部位は白色光の異なる帯域の光に対して反射、散乱または吸収を生じ、その中で反射/散乱した光信号は原光路に沿って戻り、再び対物レンズを通って分光システムに入る。
共焦点ピンホールのスクリーニング作用これは共焦点技術の核心部分である:
サンプルの焦点面から戻った光信号は、分光鏡で反射した後、共焦点ピンホールを正確に通過し、後続の検出器に入ることができる、
焦点面以外の迷光(非焦点領域の信号)は、光路が発散して針穴を通過できないため、針穴バッフルに遮られ、イメージングに参加できない。
このプロセスは「光学スライス」効果を実現し、非焦点平面の背景干渉を除去した。
信号分光と針穴を通過した白色光信号は分光モジュールに入り、このモジュールはフィルターやラスターを通じて白色光を波長で分割し(可視光帯域の赤、緑、青などのチャンネル)、異なる帯域の光信号はそれぞれ対応する検出器に受信され、電気信号に変換される。
画像の再構築と走査振動鏡の提示は、集束スポットを制御してサンプル表面で点ごと、行ごとの2次元走査を行い、検出器は同時に各走査点の信号を収集し、コンピュータシステムによって電気信号を画素点に変換し、2次元画像に結合する。Z軸(試料深さ方向)に沿って層ごとに走査すれば、多層2次元画像の重畳によって試料の3次元構造再構築も実現できる。
三、白色光共焦点の技術特徴
レーザー共焦点顕微鏡に比べて、白色光共焦点は複数のレーザー光源を必要とせず、単一光源を通じて多帯域イメージングを実現し、設備コストと光路複雑度を低減することができる、
白色光の広いスペクトル特性に基づいて、同時に異なる可視光帯域におけるサンプルの光学情報を取得することができ、天然色素、無標識サンプルのイメージング観測に最適である、
ピンホールを共焦点化するスクリーニング機構により、そのイメージング解像度とコントラストが通常の白色光顕微鏡よりはるかに高くなり、しかも無傷の三次元トモグラフィーを実現することができる。