インレット蒸発光散乱検出器光散乱原理に基づく汎用型検出装置であり、高効率液体クロマトグラフィー(HPLC)、超高効率液体クロマトグラフィー(UHPLC)及び毛細管電気泳動(CE)などの分離分析分野に広く応用されている。その核心的な優位性は伝統的な検査技術のサンプルの光学特性への依存を脱し、糖類、脂質、界面活性剤、アミノ酸、薬物及びポリマーなどの紫外線吸収、蛍光又は電気活性のない物質を検査することができることにある。
動作原理:ELSDの検出過程は霧化、蒸発、光散乱検出の3つの重要なステップに分けられる。カラムから流出した液体サンプルは霧化器に入り、窒素などの高速不活性ガスと混合して微小な液滴を形成し、エアロゾルを形成する。エアロゾルは加熱されたドリフトチューブに入り、液滴中の溶媒は急速に蒸発し、サンプル微粒子だけが残った。これらの微粒子は、レーザ光やLED光源などの光束を通過すると光散乱を生じ、散乱光強度はサンプル濃度に比例する。光電センサは散乱光を収集し、電気信号に変換し、最終的にクロマトグラフィーを出力する。
インレット蒸発光散乱検出器の操作手順:
1、起動前検査
流動相の調製:実験需要に基づき、必要な流動相を正確に調製し、その純度と成分が分析要求に符合することを確保する。
接続管路:カラム出口管路を検出器入口としっかり接続し、運転中に緩みや漏れが発生しないようにする。
ガス源を検査する:空気或いは窒素ガス源を開放し、入力圧力は通常350 kPaに設定する(具体的な圧力は計器型番とメーカーの要求によって異なる可能性があり、計器説明書を参照する必要がある)、ガスの清浄性を確保し、粒子不純物がなく、検査結果と計器部品に影響を与えないようにする。
2、電源投入と初期化
計器の電源をオンにする:検出器の背面パネルの電源スイッチをオンにして、計器は自己検査を開始して、操作ウィンドウは計器が“待機状態”にあることを表示して、そしてタイマーの時間を表示して、同時に自動的に前回の運転がシャットダウンする前に最後に採用した方法の設定を表示します。
排気と輸送流動相:必要な流動相に対して排気操作を行い、管路中の気泡を排除し、その後ポンプ輸送流動相を起動する。機器前方のガラス管中のサイフォンが液体で満たされ、霧化管中の液滴が正常であることを確保する。
フラッシング平衡流動相:適切なGain値(利得値、信号増幅用、実際のピーク型調整により、大きすぎるとフラットトップfになる可能性がある)、ドリフトチューブ温度(流動相と測定物質の性質により選択し、通常は低沸点溶媒を流動相として使用し、フラッシングチューブ温度の最大設定値は一般的に80℃、メンテナンス洗浄時に最大100℃に設定することができる)を設定し、LEDランプを点灯させ、平衡流動相のフラッシングを開始する。
ゼロ調整とベースラインの安定:洗浄完了後、ベースライン圧力の安定を確保し、ゼロ調整操作を行い、機器出力信号をゼロに戻し、後続のサンプル検査に正確な基準を提供する。
3、パラメータ設定
サンプルと分析要求:操作パネル或いはソフトウェア界面を通じて、霧化ガス流量、流動相流速、ドリフト管温度、衝突器位置などの重要なパラメータを設定する。例えば、霧化ガス流量は霧化時に形成される液滴の大きさを決定し、ガス流量が高いほど形成される液滴は小さいが、小粒子散乱光は少なく、信号は小さく、実験によって最適な信号騒音比を発生するガス流量を決定する必要がある、衝突器の位置の選択は、流動相の組成、流速、および被分析物の揮発性に依存し、重要なのは感度と流動相の十分な揮発との間で適切なバランスをとることである。
4、サンプル分析
注入試験:処理したサンプルを自動注入器または手動注入方式でクロマトグラフィーシステムに注入し、サンプルはクロマトグラフィーカラムに搬送されて分離し、分離した成分は順次蒸発光散乱検出器に入る。
データ記録と分析:検出器はサンプル成分を検出し、対応する信号強度変化を発生し、これらのデータは記録される。関連するソフトウェアを通じてデータを処理し、分析し、例えば積分、補正などの操作を行い、サンプルの定量と定性情報を取得する。
5、シャットダウンとクリーンアップ
洗浄管路と霧化器:試験が終わったら、適切な溶媒で管路と霧化器を30分以上洗浄して、残ったサンプルと不純物を除去して、詰まりと腐食を防止する。
ポンプ送液停止:洗浄完了後、ポンプ送液を停止し、一定時間(30分以上を推奨)待って、管路中の液体を十分に排出させる。
ガス源と電源をオフにする:検出器の主電源をオフにする前に、ガス源をオフにします。同時に、廃液瓶と凝縮瓶を検査し、適時に過剰な液体を捨て、液体があふれて環境を汚染したり、機器を損傷したりするのを防止する。