試料前処理技術と合わせて、HPLCが達成した高分解能と高感度は、性質上非常に近い物質の分離と同時測定を可能にし、複雑な相体中の微量成分を分離することができる。固定相の発展に伴い、生化学物質の活性を十分に維持した条件下でその分離が完了する可能性がある。

液体クロマトグラフメーカーのシステムは、貯液器、ポンプ、注入器、カラム、検出器、記録計などのいくつかの部分から構成されている。リザーバ中の移動相は高圧ポンプでシステムに打ち込まれ、試料溶液はサンプラを経て移動相に入り、移動相によってカラム（固定相）内にロードされる。試料溶液中の各成分は2相中で異なる分配係数を持つため、2相中で相対運動をする時、複数回の吸着・脱着の分配過程を経て、各成分は移動速度に大きな差を生じ、単一成分に分離されてカラム内から順次流出し、検出器を通過する時、試料濃度は電気信号に変換されて記録計に転送され、データはスペクトル形式で印刷される。

液体クロマトグラフメータの理解

分配係数は成分、流動相及び固定相の熱力学的性質と関係があり、温度、圧力とも関係がある。異なるクロマトグラフィー分離機構において、Kには異なる概念がある：吸着クロマトグラフィーは吸着係数、イオン交換クロマトグラフィーは選択性係数（または交換係数）、ゲルクロマトグラフィーは浸透パラメータである。しかし、一般的には分配係数で表すことができます。

条件（移動相、固定相、温度、圧力など）が一定で、サンプル濃度が低い（Cs、Cmが小さい）場合、Kは成分の性質だけに依存し、濃度とは関係ない。これは理想的な状態のクロマトグラフィー条件にすぎず、この条件で得られたクロマトグラフィーピークは正常なピークであり、多くの場合、濃度が増加するにつれてKが減少し、このときクロマトグラフィーピークは尾引きピークである。一方、溶質濃度が高くなるにつれてKも大きくなることがあり、このときクロマトグラフィーピークは前延ピークである。そのため、できるだけ注入量を減らし、成分のカラム内濃度を低下させ、Kを一定のタイミングにしてこそ、正常なピークを得ることができる。