細部が成否を決めるのは、実験室の科学研究者にとってもそうだ。elisaキット実験における各操作の詳細は、できるだけ排銃を少なくし、銃頭をこまめに交換し、サンプリングする際に低濃度から高濃度に加算することで、穴飛びの確率を減らすことができるため、多くのものがある。実験全体のzui後の鍵は結果の処理方法ですが、今日の技術記事では、弊社がお届けしているのはelisaキット検査結果分析方法です。
①:ELISA実験中のサンプルはすべて復孔あるいは三孔を作り、それから各濃度標準品の平均OD値を計算し、復孔の変異係数は20%未満であるべきである。
②:平均OD値から空白穴のOD値を減算します。
③:標準曲線を作成する。
本底を差し引いたOD値をX軸、標準品の濃度をY軸とし、作図ソフトを用いて適切な計算方法を得た。CurveExpert 1.4など、適切なソフトウェアを使用して図面を作成することをお勧めします。このソフトウェアは、直線、半対数、対数、四パラメータ方程式など、多くの方法を提供し、その中からzuiの適切な方程式を選択することができます。ある曲線が表中のデータと一致しているかどうかを検査するには、標準品の濃度を未知数として、対応するOD値をこの方程式に持ち込み、標準品の濃度を算出し、得られた結果は実際の濃度に近い(+/-10%)はずである。擬合度zuiの高い曲線を選択します。
標準曲線の線形性が悪い、または平行性が悪い(両穴対照穴のOD値の差が大きい)、あるいは飛び穴の現象が現れて、引き起こす可能性がある原因は酵素スケールプレートの穴の間の相互汚染、プレートを洗った後にできるだけ早く次の操作を行うことができなくて、サンプルあるいはその他の試薬を添加する時の操作の方法が間違っていて、孵化位置の遮光性がよくないか、カバーフィルムが密封されていないで水分を蒸発させて、酵素スケールプレートの穴が添加する試薬の量が異なっていてプレート孔内に入り、異なる試薬瓶の中の液体を吸収する際には、銃頭を交換し、インキュベーション環境が光を通さないことを確認し、カバーフィルムは酵素スケール板を密封し、校正された微量サンプラを使用し、もし*回液体を添加する時に銃の頭に一滴の液体が残って垂下するならば、後で銃の頭に残っている液体も垂下して、液体の体積の一致性を添加することを保証します。