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Shanghai Ruiyue Experimental Equipment Co., Ltd
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漢方丸薬DNA抽出の完全なステップ
日付:2025-11-27読み:1

錠剤剤は、薬剤の微粉または薬剤抽出物に適切な接着剤または補助剤を加えて作られた球形または球形の固体製剤であり、漢方薬の古い剤形の一つである。PCRのDNA検査案は漢方薬材の真偽鑑定の金基準となっているが、加工後の漢方薬は成分が複雑で、接着剤や添加剤を含めてPCR反応を抑制する作用があるため、DNA検査方法はこの分野に有効に応用できない。本キットは、独自開発のDNA抽出方法により、いくつかのPCR抑制成分を効果的に洗浄し、有効なDNA抽出純度を達成した。抽出したDNAは直接PCR反応に用いることができ、薬剤の真偽鑑定とドーピング検査に信頼性のある検査案を提供した。

‌分解処理‌:
丸剤を粉末に粉砕し、プロテアーゼKを含む分解液(例えばCTAB緩衝液)を加え、56℃で1〜2時間水浴し、細胞膜を破壊し、タンパク質を分解した。サンプルに多糖類が含まれている場合は、β-メルカプトエタノールを添加して干渉を抑制することができる。
‌吸着精製‌:
鄒磁石ビーズ法:分解液と磁石ビーズを混合し、DNA特異的に吸着した後、離液塩を含む洗浄液で不純物を除去する。
鄒遠心カラム法:溶解液はシリカゲル膜カラムを通過し、DNA結合後、エタノールで塩分と色素を洗浄する。
溶出と品質検査:
DNAをTE緩衝液または無菌で水洗し、紫外分光光度計でA 260/A 280比(1.8-2.0は合格)を測定した。電気泳動はストリップの完全性を観察し、尾引きや分散を避ける。
注意事項:
操作全過程で手袋を着用し、DNA酵素汚染を避ける。
多糖類含有量が高い場合は、洗浄回数を増やすか、低pH法を用いることができる。
古いサンプルは分解時間を延長する必要がある。