レーザ共焦点顕微鏡レーザー光源と共焦点技術を結合した高性能光学顕微鏡イメージング装置であり、非焦点平面の迷光干渉を除去することにより、サブ細胞級分解能の三次元イメージングを実現し、生命科学、材料科学及び医学分野に広く応用されている。
レーザ共焦点顕微鏡の核心は「共焦点光路」と「点走査イメージング」であり、具体的な過程は4段階に分けられる:
レーザー集束:レーザー光源は励起フィルタでスクリーニングした後、対物レンズを通じてサンプルの単一の微小点に集束し、サンプルを励起して蛍光を発生させる。
信号収集:サンプルからの光は原光路に沿って戻り、分光鏡で反射した後、ピンホール絞り(共焦点孔)に入る。焦点を合わせた光だけがピンホールを正確に通過することができ、非焦点層(サンプルの上下層など)からの迷光はピンホールに遮られる。
点走査とイメージング:走査システムを通じてレーザービームがサンプル表面で点ごと、行ごとに走査することを制御し、各点の光信号は光検出器に受信され、電気信号に変換される。
3 D再構築:コンピュータは各走査点の信号を画素に変換し、2 D画像を構成する、対物レンズとサンプルの距離を調整することにより、異なる深さの2次元断層画像を取得し、ソフトウェアを介してサンプルの3次元立体画像を再構築した。
日常メンテナンス事項:定期的に対物レンズ(レンズ紙にレンズ洗浄液をつけて軽く拭く)を清掃し、レーザー直射眼を避ける(操作時に専用レーザー防護鏡を装着する)、サンプル台の清潔を保持する(汚染サンプルを防止する)。