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Shanghai Jintong Instrument Co., Ltd
基礎から進級まで：徂徠カード倒置顕微鏡操作ガイド
日付：2025-07-18読み：0
徂徠カード倒置顕微鏡その柔軟な対物レンズ配置、多種のサンプルに適したステージ設計により、細胞培養、組織切片、材料科学などの分野の研究利器となっている。その操作技術を身につけることで、実験効率を高めることができ、機器の寿命を延ばすこともできる。以下では、基礎操作からステップアップテクニックまで、ステップ別に詳しく説明します。
一、基礎操作：規範起動とサンプル観察
1.電源投入と環境準備
電源投入後、顕微鏡本体の電源スイッチを入れ、接眼レンズの視野が明るくなったら、蛍光光源をオンにする（蛍光観察が必要な場合）。注意：蛍光光源は5〜10分間予熱して安定光強度を達成し、頻繁にスイッチを入れて電球の寿命を延長しないようにする必要がある。
振動がイメージングに影響しないように顕微鏡ベースを定常状態に調整します（防振台や厚いゴムマットの上に置くことをお勧めします）。
2.サンプルの配置と焦点調整
培養皿、多孔質板、またはスライドをステージ中央に置き、サンプルが対物レンズの直下にあることを確認する（逆さ顕微鏡対物レンズが上向きになり、サンプルが上から置かれる）。
まず、4 Xや10 Xなどの低倍数対物レンズを使用して焦点を粗く調整します。粗いつまみを使って対物レンズをゆっくりと下げてサンプルに近づき（触れないように注意して）から、画像が鮮明になるまでゆっくりと回転します。高倍対物レンズ（例えば20 X、40 X）を切り替える場合は、対物レンズの動作距離が短いため、操作をより柔軟にする必要があります。
3.光路と撮像調整
集光鏡の高さと絞りの大きさを調節する：低倍鏡観察時、集光鏡の位置は低く、絞りは大きく調整する；高倍鏡の場合は集光鏡を上げ、絞りを小さくしてコントラストを高める必要があります。
接眼レンズを通して観察し、焦点調整をしすぎて対物レンズやサンプルを損傷しないように、粗／細調整つまみを画像が最も鮮明になるまで調整する。
二、ステップアップ技術：機能拡張と正確なイメージング
1.蛍光観察とチャンネル切替
蛍光イメージングが必要な場合は、まずフィルターブロックが目標蛍光チャネル（例えばDAPI、FITC、TRITC）に切り替えられたことを確認し、顕微鏡側面のフィルターブロックターンテーブルを介して動作する。
蛍光励起光強度の調整：明るすぎによる蛍光消光を回避し、信号が明瞭で背景ノイズが低いまで、電圧調整つまみやソフトウェア制御（パソコンに接続する場合）によって徐々に強度を高めることができる。
2.位相差とDICイメージング
位相差観察：位相差リング（10 X対物レンズが10 X位相差リングに対応するように対物レンズと整合する必要がある）を挿入し、集光レンズ位相板の位置を調節し、無染色サンプル（生細胞など）のコントラストを増強する。
DIC（微分干渉コントラスト）観察：DICプリズムを取り付け、プリズム偏光角度と光強度調節つまみを調節することにより、サンプルの微細構造（例えば細胞骨格、細胞膜縁）を際立たせる。
3.画像収集とパラメータ最適化
デジタルカメラに接続すれば、ソフトウェア（例えばLeica Application Suite）を通じて露光時間、利得値を設定する：高倍鏡下で露光時間を短縮する必要があり（過露光を避ける）、生細胞イメージングは適切に利得を高めて輝度を高めることができる。
マルチチャネル撮影時には、明場、蛍光、または位相差画像をそれぞれ収集し、ソフトウェアに重畳または比較分析し、パラメータが一致していることを確認する（視野、同じ露光時間のように）。
三、メンテナンスと注意事項
1.対物レンズ清掃：専用レンズ紙または風船を使用して対物レンズ表面のほこりを清掃し、レンズに直接接触しないようにする、液体に染みたら、無水エタノールで軽く拭き取る。
2.物置台のメンテナンス：鋭いサンプルが物置台の表面を傷つけないようにし、使用後直ちに残留培地または液体を整理する。
3.シャットダウンプロセス：蛍光光源をシャットダウンし（室温まで冷却してから電源を切る必要がある）、対物レンズを低倍位置に移動し（高倍対物レンズの長期的な圧力を避ける）、最後にホスト電源をオフにする。
徂徠カード倒置顕微鏡の操作は基礎焦点調整からステップイメージングまで、すべてのステップは規範と細部を考慮しなければならない。その核心技術を把握することで、高品質の画像を効率的に取得することができるだけでなく、機器の性能を十分に発揮することができ、科学研究と実験に信頼性のあるサポートを提供することができる。