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instrumentb2b>ソリューション>アンジオテンシンI抽出を用いた従来のSPEカラムと磁性抽出剤の性能比較
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アンジオテンシンを利用する私はの抽出は比較的伝統的であるSPE 社カラムと磁性抽出剤の性能

キーーワード

アンジオテンシン私は、液体クロマトグラフィー質量分析、固相抽出、アンジオテンシン Iアング IレニンLC-MS/MSSPE 社

まえがき

アンジオテンシン私はアング I)は比較的によく見られる臨検マーカーの一つであり、アンジオテンシン私は抽出効果の試験は、各種サンプル前処理手段の臨床適用性と技術性能を効果的に評価することができる。

本論文では、市販されている有名な輸入ブランドを比較することでHLB 96ビットSPE 社多孔質板とHLB磁性SPE 社抽出剤抽出アング I試験の各方法学指標は、両者の性能表現を直感的に比較した。臨床的にもSPE 社サンプル前処理技術の発展の見通しは非常に価値のある参考を提供した。

実験デザイン

下表のように、1%BSA4つの濃度レベルのアング I安定同位体標識を補助するシリーズ標準溶液アング I内付き文字

アング I

濃度(ng

内標準濃度(ng

LOQ

0.5

10

低レベル(L

7.5

10

中レベル(M

30

10

高水平(H

80

10

次の条件のSPE 社、ある有名な輸入ブランドに応用HLB 96ビットSPE 社多孔質板適切な正圧を使用する96SPE 社操作装置はサンプルを実行する。

名称

操作

かっせい

使用する500μLメタノール活性化SPE 社プレート2回

つりあい

使用する500μL5%ぎ酸水溶液の活性化SPE 社プレート2回

上書き

500μLのLOQ、低(L)、中(M)、高(H)サンプル

リンス1

使用する500μL5%ぎ酸水溶液リンスSPE 社プレート2回

リンス2

使用する500μL20%メタノール水溶液リンスSPE 社プレート2回

ようり

穴ごとに別々に入れる250 μLメタノール、溶離液を収集96オリフィスプレート

2.png

これに対応するのは、オート M32全自動抽出器は以下のプログラムを設定してサンプルを実行し、サンプルごとに使用する2mg HLB磁性抽出剤

指示

ようえき

アパーチャ位置

溶媒量(μL

かっせい

メタノール

1

500

つりあい

5%甲酸水溶液

2

500

上書き

サンプル溶液

3

500

リンス1

5%甲酸水溶液

4

500

リンス2

20%メタノール水溶液

5

500

ようり

メタノール

6

250

はいきぶつ

/

2

600

3.png

データと比較

実験設計で述べた4つの標準サンプルを、それぞれ3回抽出を繰り返し、2つの前処理方法を比較して抽出した後、LC-MS/MS上で測定した相対標準偏差を下図に示します。その中で、左側の青い柱はある有名な輸入ブランドを使用しているHLB 96ビットSPE 社多孔質板抽出後の測定結果、右側オレンジカラムは磁性抽出剤を用いた抽出後の測定結果である。

4.png

5.png

b,低レベル(L)再現性

6.png

7.png

2つの前処理方法は外表ピーク面積、内標準ピーク面積、計算濃度における相対標準偏差にかかわらず顕著な差はないが、磁性抽出剤の結果はほとんどのレベルで伝統的な96ビットSPE 社多孔質板

抽出率の比較では、ある有名な輸入ブランドを選択しますHLB 96ビットSPE 社多孔質板を抽出して測定したピーク面積を基準とする(100%)を用いて、磁性抽出剤抽出後に測定したピーク面積と比較した。下図のように、左側の青い柱は有名な輸入ブランドを使用していますHLB 96ビットSPE 社多孔質板抽出後の測定結果、右側オレンジカラムは磁性抽出剤を用いた抽出後の測定結果である。

8.png


最後に下図のようにLOQレベルの2つの方法で抽出した後、LC-MS/MSで得られたMRMクロマトグラフィー。図aは従来の96ビットSPE多孔質板を用いて得られたクロマトグラム、図bは磁性抽出剤を用いて得られたクロマトグラムである。すべての濃度レベルにおいて、磁性抽出剤の抽出測定ピーク面積は伝統的な96ビットSPE 社多孔質板であり、いずれも後者を超える50%以上、最高で約1.8倍になる。

9.png

結果の検討
明らかにLOQレベルでは、磁性抽出剤の抽出により得られるクロマトグラフィーピークの高さは従来の96ビットSPE 社多孔質板抽出は、抽出率結果と*一致する。

上記のデータ比較により、下表のような結果を得ることができます。

ぜったいはんぷくせい

そうたいはんぷくせい

ちゅうしゅつりつ

LOQ品質

動作モード

某有名輸入ブランド96ビットSPE 社たこうばん

より良い

より良い

適度

適度

手動+負圧装置

じきちゅうしゅつざい

より良い

より良い

50%以上

より良い

少量の手動+自動デバイス


いずれも某有名輸入ブランドのHLB 96ビットSPE 社多孔質板同時に、オート M32全自動抽出器固有の「一次液移動」と「無人」操作モードは、サンプル前処理における人為的な参加を低減するとともに、自動化レベルを大幅に向上させた。