嫌気培養箱の注意事項

嫌気培養箱は無酸素環境下で細菌培養及び操作を行う実験装置である。それは厳格な嫌気状態の一定の温度培養条件と系統的で科学的な作業領域を提供することができる。嫌気性培養箱内で操作培養することで、成長しにくい嫌気性生物を培養することができ、また、従来の嫌気性生物が大気中で操作している間に酸素に接触して死亡する危険性を回避することができるため、本装置は嫌気性生物検出科学研究の理想的なツールである。本装置も多用の良好な機器であり、例えば操作方式を変更し、微小好気性菌の成長繁殖に良好な成長条件を提供し、内蔵を採用することができる・酸素含有検出器（自己配合用）、検出及び必要に応じて操作パネルに配設される流量調整装置。ミクロ好気性菌の規定酸素含有量を入力することにより、ミクロ好気性菌の成長繁殖を満足させ、良好な成長条件を提供することができる。

1.機器はできるだけ空気清浄で温度変化の少ない場所に設置する。

2.電源を入れる前に、各構成の付属機器、計器の使用説明を全面的に熟知し、理解し、正しい使用方法を把握しなければならない。

3.培養物の入れ方は操作室内で嫌気環境に達した後に入れなければならない、

4.故障（ガス停止などの原因）操作室内が10時間の嫌気状態を維持することができる（10時間を超えると必要に応じて培養物を取り出して別の処理を行う）、

5.常に気道から空気漏れがないか注意する、

6.ガスボンベを交換する時、気管をしっかり締め、酸素含有ガスの流入を避けるように注意する。

真空ポンプは要求通りに使用し、定期的に給油を検査する。

一、操作室嫌気環境の形成

1使用要求に応じて必要な部品と器具を置き、操作室内に2つの無毒ビニール袋を入れる。

2電源を入れて照明灯をつけ、温度計をつけ、必要な温度と安全温度を調節する。

3操作室内に1000 gのパラジウム粒子（閉鎖）と500 gの乾燥剤を入れ、美蘭指示剤（閉鎖）を入れた。

4サンプリング室内の外扉を閉め、真空引き検査する。

5操作室内DI一次置換（窒素置換）：

（1）まずゴムホースで室内吸気口を挿入操作し、もう一方の端はビニール袋に挿入する。

（2）窒素ガスの吸気路を投入し、窒素ガス制御弁を開き、2つのビニール袋に窒素ガスを充填させ、袋口を締め付ける。

（3）観察板フランジリングにラテックス手袋を被せて締め付ける。

（4）ビニール袋内の窒素ガスを操作室内に徐々に放出する。

6操作室DI二次置換（窒素置換）窒素充填プロセスを1回繰り返し、足踏みスイッチで随時排気を開閉するように注意する。

7操作室DI三次置換（混合ガス置換）：

（混合ガス配合比：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）

（1）交換ガス路は混合ガス通路のバルブを開けて空気を入れ、空気を入れる時はいつでも足踏みスイッチを入れて排気を開閉しなければならない。

（2）混合気がビニール袋に充満した後、混合気直通弁（三方弁）を閉じ、混合気を流量計の入力操作を経て流量計を調整し、流量は毎分10ミリリットル程度である。

（3）ビニール袋内の混合気を徐々に操作室内に排出する。

（4）三次換気後、操作室内ガスの酸素含有量は極微量状態にある。

8操作室内にパラジウム粒脱酸素剤を入れ、脱酸素触媒電源を入れて触媒脱酸素を行い、1時間後に美蘭指示剤（美蘭アン瓶）を開けてその変化状況を観察し、操作室内が嫌気環境に達するように変色しない。

9紫外線滅菌ランプをつけ、室内で滅菌処理を行う。滅菌時間は自定する。

二、菌種の投入と培養

1サンプリング室内のドアを検査し、閉める。

2サンプリング室外ドアを開け、菌種をサンプリング室に入れた後、すぐ外ドアを閉めます。

3サンプリング室の窒素充填置換3回の過程：まず真空度500ミリ水銀カラム（66 Kpa）以上を吸引して停止し、その後人工的に窒素バルブを開けて空気を入れ、針をゼロ位に戻してから次の操作を行う。

4より低い真空度を選択するには、置換の回数を増やす必要があります。

5サンプリング室内の外扉が開き、閉まっている場合は真空度100ミリ水銀柱（13 Kpa）を吸引して検査し、操作を支援しなければならない。

6嫌気培養箱の長期連続使用が必要な条件：

（1）毎日操作室内で美蘭指示剤を開けて観察し、正常な状況で使用する。正常でなければ換気をし直さなければならない。

（2）長期にわたり微量の混合ガスを連続的に入力し、補充された水素ガスエネルギーと微量の酸素を結合させて触媒吸収により、室内の嫌気状態を保証し、補充混合ガス流量は毎分10ミリリットル程度に選定する。

（3）連続培養運転1日、脱酸素剤と乾燥剤を交換する。

7接種棒滅菌器の応用：

（1）いつでもニッケルクロム電熱線で電極を短絡して赤熱化して殺菌する（接種棒）

（2）ワックスを溶融するところに直接置くことができ、試験管のワックス封止口が回転してワックスを溶融する。

8操作室内の培養箱内の温度は任意に選択し、制御することができる。

9混合ガスボンベ、窒素ガスボンベの出力圧力調整：出力圧力が0.1 Mpa程度になるように減圧弁を調整する。