PT全波長酵素尺度計紫外−可視光吸収、蛍光、化学発光などの多種の測定モードを一体化した高精度分析機器であり、生命科学、臨床診断、薬物研究開発及び食品安全などの分野に広く応用されている。その核心的な優位性は広い波長カバー(通常190-1000 nm)と多機能検査能力にあり、基礎科学研究から工業生産までの多様な需要を満たすことができる。これは光吸収の法則(ビル・ランベルトの法則)に基づいて、光源を通じて特定の波長光を放射し、サンプルを通じて吸収した後、検出器は残存光強度を測定し、吸光度(A)を計算して目標分子濃度を決定する。
PT全波長酵素尺度計の操作は実験需要(例えば検査モード、サンプルタイプ)と結合してパラメータ設定とフロー制御を行う必要があり、核心ステップは「準備-設定-検査-データ処理」を含み、以下は汎用操作フローである:
一、操作前準備
サンプルと試薬の準備
検査するサンプル(例えばELISA板、核酸溶液、細胞懸濁液など)が実験方案に従って処理済みで、しかも微孔板内に気泡、液滴掛壁がないことを確保する(気泡があれば、軽く板壁を叩いて除去することができ、掛壁液滴はティッシュペーパーで縁を吸い取る必要がある)。
空白対照、標準品、品質管理品を用意し、予め設定されたレイアウトに従って微孔板に配列する(混同を避けるために孔位レイアウトを記録することを提案する)。
機器と環境検査
酵素ゲージの電源コードが正常に接続されていることを確認し、電源を入れる前にサンプル室が清潔かどうかを検査し(ほこり、液体が残っていない)、必要な時にほこりのない布で拭く。
実験に温度制御(例えば37℃でインキュベート)または振動が必要な場合、機器関連機能が正常であること(例えば温度制御モジュールが設定温度に達することができるか)を事前に確認する。
コンピュータと酵素スケールの電源を入れ、付属の操作ソフトウェアを起動し、機器の自己検査が完了するのを待つ(通常は「準備完了」状態を示す)。
二、検査方法の設定
検出モードの選択
実験タイプに基づいてソフトウェアで対応する検出モードを選択する:
吸収光検出(ELISA、核酸定量など):検出波長(例えば450 nm主波長、630 nm参照波長)、帯域幅(デフォルト1〜5 nm)を設定する必要がある。
蛍光検査:励起波長(例えば485 nm)、発光波長(例えば535 nm)を設定し、上部/下部示度を選択する必要がある(液体サンプルは通常上部を選択し、細胞培養物は底部を選択する)。
化学発光検出:波長を設定する必要はなく、直接「化学発光」モードを選択し、サンプル室の光源を閉じて干渉を減らすことに注意する。
動力学検出:検出時間間隔(例えば10秒ごとに1回読む)、総検出時間(例えば30分)を追加設定し、温度制御(恒温反応が必要な場合)をオンにする必要がある。
微孔板パラメータの設定
96オリフィスプレート、384オリフィスプレートなどのオリフィスプレート仕様を選択し、検出範囲を定義します(「フルプレート検出」など)、または特定のオリフィス(A 1-H 12など)。
エッジ効果または穴の一部を除外するには、ソフトウェアで穴を「検出しない」とマークすることができます。
アクセシビリティ設定
温度制御:反応に一定温度(例えば酵素反応は37℃)、目標温度(誤差は通常±0.1℃)を設定し、機器が設定温度に予熱されるのを待つ。
振動:測定前にサンプルを混合する必要がある場合、振動モード(例えばリニア振動)、回転速度(例えば500 rpm)と時間(例えば10秒)を設定する。
参照波長補正(吸収光検出):「二波長検出」をオンにし、参照波長(例えば630 nm)によって背景干渉(例えば微孔板の傷、気泡)を差し引いて、データの正確性を高める。
三、サンプル検査
ローディングプレート
微孔板をサンプル室のトレイに軽く置き、プレートの縁がトレイの位置決め溝に位置合わせされていることを確認し(位置ずれによる読み取りエラーを回避)、サンプル室のドアを閉じます。
起動検出
ソフトウェアの中で「検査を開始する」をクリックして、計器は自動的に事前設定方法に従って運行して、スクリーンはリアルタイムに検査の進度(例えば完成した穴の位置、現在の示度)を表示します。
測定中に機器に触れたり、試料室のドアを開けたりしないようにして、光路の安定性を妨げないようにします。
四、データ処理とエクスポート
リアルタイム結果の表示
検出が完了すると、ソフトウェアは自動的に元のデータ(吸光度値、蛍光強度など)を生成し、表または熱力学図の形式で表示します。
単孔データ、平均値(標準品重複孔の平均値など)を表示したり、標準曲線を生成したり(標準品濃度が設定されている場合)。
データ分析
実験ニーズに応じたデータ処理:
定量分析(例えばELISA):標準品濃度と対応信号値を通じて標準曲線(線形、四パラメータフィッティングなど)をフィッティングし、ソフトウェアは自動的に未知サンプル濃度を計算する。
比率計算(例えば核酸純度):吸収光検出において260/280 nm、260/230 nmの比率を自動的に計算し、サンプル純度を評価する。
動力学曲線:信号値-時間曲線を生成し、反応速度、半減期などのパラメータを計算することができる。
データのエクスポートと保存
データをソフトウェアのデフォルトフォーマット(.csv、.txtなど)として保存するか、Excel、PDFフォーマットにエクスポートしてレポート作成に使用します。
検出方法テンプレートも保存することをお勧めします(次回同じ実験を直接呼び出すことができ、繰り返し設定する必要はありません)。
五、操作後整理
シャットダウン装置
検査が終わったら、微孔板を取り出し、サンプル室を整理する(液体漏れがあれば直ちに拭く)。
酵素スケールソフトウェア、機器電源、コンピュータ電源を順次オフにします。
記録と清掃
実験情報(例えば測定日、計器型番、方法パラメータ)を記録し、データの遡及を容易にする。
試料室とトレイを定期的に清掃し(75%アルコールで拭き取り、腐食性試薬の残留を避ける)、長期使用時にダストカバーを被覆する必要がある。